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科樂福CLOVER 228多功能凈化柱展青霉素柱
Clover- SepMyco 228多功能固相凈化柱
高效液相色譜法(HPLC)檢測展青霉素
參考標(biāo)準(zhǔn)
GB 5009.185-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中展青霉素的測定
試劑配制
乙酸溶液:取10mL乙酸加入250mL水,混勻。
果膠酶(液體):活性 ≥1500U / g , 2℃~8℃ 避光保存。(P/N: Clover 228-01)
樣品提取
液體試樣(蘋果汁、山楂汁等)
稱取4g試樣(準(zhǔn)確至0.01g)于50mL離心管中,加入21mL乙腈,混合均勻,在6000r/min下離心5min,待凈化。
固體、半流體試樣(山楂片、果丹皮、蘋果果泥、蘋果果醬、帶果粒果汁等)
稱取1g試樣(準(zhǔn)確至0.01g)于50mL離心管中,再加入10mL水與150μL果膠酶溶液混勻,室溫下避光放置過夜后,加入10.0mL乙酸乙酯,渦旋 混合5min,在6000r/min下離心5min,移取乙酸乙酯層至梨形燒瓶。再用10.0mL乙酸乙酯提取一次,合并兩次乙酸乙酯提取液,在40℃水浴中用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至干,以2.0mL乙酸溶液溶解殘留物, 再加入8mL乙腈,混勻后待凈化。
樣品凈化
將提取液通過凈化柱凈化,棄去初始的1mL凈化液,收集后續(xù)部分。用吸量管準(zhǔn)確吸取5.0mL凈化液,加入20μL乙酸,在40℃下用氮氣緩緩地吹至近干,加入乙酸溶液定容至1mL,渦旋30s溶解殘渣,過0.22μm 濾膜,收集濾液于進(jìn)樣瓶中以備進(jìn)樣。
液相色譜條件
色譜柱:Cloversil-C18 4.6*150mm(5um)或4.6*250mm(5um)
流動相:乙腈-水(5+95,v/v)或甲醇-水(10+90,v/v)
流速:0.8mL/min
檢測器:紫外檢測器,波長276nm
進(jìn)樣體積:20~100uL
柱溫:40℃
科樂福CLOVER 228多功能凈化柱展青霉素柱
品牌:科樂福clover
生產(chǎn)廠家:北京中檢維康生物技術(shù)有限公司