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維生素B12鈷胺素ELISA試劑盒
iELisa維生素B12檢測試劑盒
(C/N: CE2131)
---北京中檢維康生物技術有限公司
1. 概要
維生素B12又叫鈷胺素,是唯義含金屬元素的維生素。自然界中的維生素B12都是微生物合成的,高等動植物不能制造維生素B12。維生素B12是唯義的一種需要一種腸道分泌物(內源因子)幫助才能被吸收的維生素。有的人由于腸胃異常,缺乏這種內源因子,即使膳食中來源充足也會患惡性貧血。植物性食物中基本上沒有維生素B12。它在腸道內停留時間長,大約需要三小時(大多數水溶型維生素只需要幾秒鐘)才能被吸收。維生素B12的主要生理功能是參與制造骨髓紅細胞,防止惡性貧血;防止大腦神經受到破壞。
2. 原理
本試劑盒的測定是基于免疫學中抗原抗體特異性反應的原理而建立的。微孔板包被有VB12抗原。加入VB12抗體和VB12標準品或樣品提取液。標準品或樣品中提取的VB12能與酶標板上的VB12包被原競爭性地結合定量的抗體,沒有結合的抗體、標準品或樣品中提取的VB12在洗滌步驟中被除去。再加入酶標二抗與微孔中的VB12抗體反應。洗滌除去沒有反應的酶標二抗。加入底物溶液溫育,酶標記物將無色的顯色劑轉化為藍色的產物,加入終止液后顏色由藍色轉變為黃色,在450nm 處測量每孔的OD值。OD值與樣品中的維生素B12含量成反比。
3. 試劑盒組成
1) 包被有抗原的96 微孔板: 1 塊(96 孔,12 條×8 孔)
2) 維生素B12標準品:0ng/mL;0.5ng/mL;4.0ng/mL;10ng/mL;50ng/mL1瓶 × 1.0mL
3) VB12抗體工作液: 1 瓶 × 10mL
4) 酶標二抗: 1 瓶 × 15mL
5) 10× 濃縮洗滌液: 1 瓶 × 50mL
6) 稀釋緩沖液: 1 瓶 ×50mL
7) 顯色底物: 1 瓶 ×13mL
8) 終止液: 1 瓶 × 7mL
9) 試劑盒說明書:
測定之前注意事項
使用前將所有試劑平衡至室溫(20-25℃)。
使用后迅速將試劑放入2-8℃冷藏。
在ELISA分析中的再現性,很大程度上取決于洗板的一致性,正確的洗板操作是ELISA測定程序中的要點。
所有溫育過程應避免陽光直射,并按要求用蓋板覆蓋住酶標板。
注意事項
1) 室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫(20- 25℃)會導致數值偏低。
2) 在洗板過程中如果出現板孔干燥過久的情況,則會出現標準曲線不成線性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3) 標準物質和顯色液對光敏感,避免直接暴露在光線下。
4) 混合要均勻,洗板要*(包括加樣品和標準液的時候都必需充分混合均勻)。
5) 終止液為強酸性物質,避免接觸皮膚。
6) 不要使用過了有效期的試劑盒,也不要使用不同批次的試劑盒,這樣會引起測定誤差。
7) 試劑盒的儲存條件是2~8℃,切勿冷凍。
維生素B12鈷胺素ELISA試劑盒