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活細胞成像系統(tǒng)在實際應(yīng)用上有哪些功能？
閱讀：802 發(fā)布時間：2020-9-15
活細胞成像系統(tǒng)是用于活細胞長時間、高清晰度、高靈敏度成像的設(shè)備。當用活細胞染料標記細胞內(nèi)特定生物大分子，或者使用熒光蛋白標記體內(nèi)特定蛋白時，使用該熒光染料或者熒光分子特定的激發(fā)光線激發(fā)，通過探測其特用的發(fā)射光線即可探測到該生物大分子?；罴毎上裣到y(tǒng)一方面控制細胞生存的外部環(huán)境，提供合適的溫度、適度和pH，讓細胞處于好的狀態(tài)。另外一方面通過高靈敏度CCD捕捉細胞中的微弱熒光，長時間觀察細胞中的熒光分子的運動，具體揭示細胞間或細胞內(nèi)生物大分子的變化過程。
主要用途：
針對活細胞在體外模擬體內(nèi)環(huán)境的條件下，進行顯微成像采集定時拍攝，在白光或熒光下觀測活細胞的增殖細胞遷移粘附等等進行細胞分析成像；實現(xiàn)在細胞水平上的定性和定量分析、活細胞圖像處理、活細胞動態(tài)示蹤。在分子水平，可做到基因定位定量表達的動態(tài)分析、蛋白質(zhì)合成降解運輸和相互作用的動態(tài)研究、細胞骨架的代謝動力學測定和細胞周期各時相的動態(tài)觀察等。
活細胞成像系統(tǒng)的主要功能為：
1、多維成像：目前可以做到六維成像。通過光學切片技術(shù)，實現(xiàn)對樣品的3D觀察，構(gòu)建樣品的立體結(jié)構(gòu)。
2、3D還原型反卷積處理：顯微鏡的分辨率和圖像的對比度取決于物鏡收集的光學信息。顯微鏡光路中衍射和折射現(xiàn)象的存在，使得樣品信號的位置和強度都發(fā)生了變化，降低了系統(tǒng)的分辨率和圖像的質(zhì)量。API作為對圖像數(shù)據(jù)進行反卷積處理早的實踐者，將顯微鏡的硬件設(shè)計和后期軟件處理結(jié)合在一起，通過對光學信號的3D還原型反卷積處理，大大提高了顯微鏡的靈敏度和分辨率。
3、延時攝影： 通過軟件jing確的控制，拍攝的時間間隔從數(shù)秒到數(shù)小時不等，在長時間拍攝下也不會造成熒光信號的淬滅。根據(jù)實驗需求的不同，無論單一層面還是三維結(jié)構(gòu)，都可以獲得良好的效果。
4、高速離子成像：結(jié)合高速CCD和高效的光路，在512×512像素下仍然可以實現(xiàn)21幀/秒的成像速度。對于快速的離子濃度的變化，zui快可以50-100幀/秒的速度獲取圖像。
5、熒光共定位分析：通過比較多個熒光通道的定位情況，即可知道他們在空間上和時間上的分布信息，進而得到相應(yīng)的熒光信號是否存在相互作用、協(xié)同運動、定向運輸?shù)取?/div>
6、熒光共振能量轉(zhuǎn)移：DeltaVision特制的活細胞濾片組保證CFP/YFP，GFP/mCherry（RFP）熒光強度的jing確記錄，并進一步計算出蛋白對之間jing確的能量轉(zhuǎn)移系數(shù)。