又是一年科研高峰期，很多老師和同學們用上了碧芯生物的Beadstar-mPlex®多細胞聯檢試劑盒，也咨詢了很多問題，在這里，我們把問題總結一下，統一回復大家

一檢測項目部分常見問題

1 Beadstar-mPlex®多細胞聯檢試劑盒可以檢測哪些細胞因子？

2 如果只檢測幾種，能否用Beadstar-mPlex®多細胞聯檢試劑盒？

可以，我們這個聯檢試劑是可以靈活組合的，可以根據檢測目的，自由選擇幾種細胞因子聯合檢測（前提是在我們所提供的細胞因子范圍內進行選擇，見題1）。試劑盒也是根據需要檢測的細胞因子數量來定價的。

二 樣本制備部分常見問題

1 檢測需要提供樣本是什么，需要多少檢測樣本量？

樣本：細胞培養上清、血清

所需樣本量：血清（25-50 μL）；細胞上清（25-50 μL）

2 要使用Beadstar-mPlex®多細胞聯檢試劑盒對流式細胞儀有什么要求？

流式細胞儀需要有PE，APC ,APC-CY7 3個熒光通道。

3 是不是每次實驗都要使用一瓶新的標準品？

標準品在配成溶液后不穩定， 在配制成溶液的12小時后將不能再使用，在每次實驗前都要重新配置新的標準品溶液。Beadstar-mPlex®多細胞聯檢試劑盒（50T）會配置1管標準品，Beadstar-mPlex®多細胞聯檢試劑盒（100T）會配置2管標準品。此外，也有單獨的標準品可以購買。

4 需不需要振動混合捕獲微球？

在使用之前 捕獲微球必須充分的振動混合， 從微球混合液試管中分到，每一個實驗管之前， 直至在送到儀器進行上樣檢測之前 反應管都必須充分振動混合， 這是由于充分的振動能夠防止微球聚集成團， 若混合不足會導致在進行樣品分析時候出現檢測到很少或者沒有檢測到微球的情況 ，因此在使用流式細胞儀分析標準品或者樣品之前， 必須充分振蕩混合微球， 試驗管在放置到流式細胞儀上檢測前需要振蕩混合3-5秒鐘， 這樣在FL3通道里面能夠更好的分辨出帶有不同標志的微球。

三 上機檢測部分常見問題

為什么實驗結果樣品都顯示高度的陽性？

可能是因為樣品的濃度太高 請對您的樣品, 進行不同稀釋度的檢測， 如果所有樣品都顯示陽性或者高于標準品的最高濃度讀數， 這時候請對您的樣品進行進一步的稀釋 因為您的樣品的濃度已高于本系統的正常檢測范圍。

四 結果分析常見問題

1 Beadstar-mPlex®多細胞聯檢試劑盒檢測結果是否可直接與ELISA的分析結果進行對比?

不可以，Beadstar-mPlex®多細胞聯檢試劑盒是基于流式熒光法的，雖然流式熒光法檢測體系相對于ELISA分析具有良好的優勢 能夠提供更高的敏感性和更大的濃度檢測范圍， 但是兩者得出的實驗數據不能夠直接比較。需對Beadstar-mPlex®多細胞聯檢試劑檢測到的數據通過和已有的ELISA數據進行校正，得到兩者的相關性結果。

2 標準品和/或樣本的平均熒光強度過低的原因是什么？

1) 反應溫度低 2) 反應時間短 3) 樣本過度稀釋4) 孵育過程中未避光

3 聯檢細胞因子的檢測線性范圍一致嗎

不一致，每一種細胞因子都有對應的檢測范圍（見說明書，試劑盒說明書上有詳細說明）。我們不建議研究者根據標準曲線外推低于標準曲線值的實驗報告數值。