C666-1人鼻咽癌細胞株容易形成空泡,不傳代的老細胞,在顯微鏡下可見到有些細胞的胞漿突出,然后脫落成死細胞,還有多核巨細胞。在這二株細胞,特別是CNF細胞的單層或多層細胞上有很多圓形細胞,核大,漿少。在培養液中也有大量圓的脫落細胞。將培養液中的懸浮細胞接種于培養瓶,細胞仍能貼瓶,生長出原來的上皮樣細胞或梭形細胞。將CNE,CNF細胞和這二株細胞的脫落細胞培養成單層后,不傳代,每周換液二次,繼續培養7個月,未能得到類淋巴母細胞株,在培養過程中未見到腫瘤組織培養中常見到的成纖維細胞生長。
C666-1人鼻咽癌細胞株的操作方法:
1.貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37°C水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,379C孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于園形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37°C溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2.懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37°C溫箱培養。
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