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TMB單組分顯色液使用方法

來源:北京索萊寶科技有限公司   2016年10月29日 16:42  

目前酶免疫分析(EIA)技術,已被廣泛應用于抗原,半抗原或抗體的定量或定性檢測分析。辣根過氧化物酶(HRP)及其偶聯物是酶聯免疫分析技術中常用的一種酶,由于3,3',5,5'-四甲基聯苯胺(TMB)在HRP的顯色反應體系中,比其它色原具有更高的靈敏度且無至癌性而被廣泛應用。TMB主要應用于酶聯免疫吸附實驗(ELISA),免疫斑點雜交或者免疫組化以及氯和過氧化氫的檢測分析。為了滿足不同的試劑盒產品研發與生產以及科研需求,本公司專門研制了針對不同類型的基于HRP的免疫分析用TMB顯色液。

TMB單組分顯色液特點:    

即用型:無需混合,方便快捷,減少誤差   

靈敏度高:不低于A.、B液  

 穩定性好:2-8℃保存,有效期不低于36個月;顯色終止后讀數穩定   

背景低:底物溶液在650nm檢測時檢測OD值小于0.04   

質量可靠:產品批間差異小   

外觀:本試劑一般情況下為無色,有時略顯淺藍色或淺黃色

TMB單組分顯色液使用方法:     

用適當的干凈容器(用純凈水反復沖洗),倒出適量的單組分TMB顯色液,待達到室溫后即可使用。

加液:加完HRP結合物并孵育一定時間后,用適當洗滌液洗板3-5次,每孔加TMB顯色液100ul。 根據個人實驗需要,在室溫(15-25℃)或37℃下避光溫育10-30分鐘或更長時間,直至顯色至預期深淺。

終止:加入等體積的1M 鹽酸或硫酸溶液終止反應,孔中反應液由藍色變為黃色。

讀數:終止反應后30分鐘內在450nm處測定吸光值。

注意:如果出現高的反應背景或沉淀,表明TMB底物反應過于強烈。為了避免產生沉淀,可在終止后馬上讀數;或者進一步稀釋一抗和/或HRP結合物。

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