植物蔗糖轉化酶(INV)ELISA試劑盒
本試劑盒只能用于科學研究,不得用于臨床診斷。
以下文字為產品簡介,詳情以說明書為準,
適用于檢測人動植物組織勻漿、細胞上清、血清、血漿、尿液或其他相關生物液體中濃度。
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法,往預先包被抗體的微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
試劑盒規格及配置
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 |
微孔酶標板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 |
標準品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL |
底物A | 6mL | 3mL |
底物B | 6mL | 3mL |
終止液 | 6mL | 3mL |
封板膜 | 2張 | 2張 |
說明書 | 1份 | 1份 |
自封袋 | 1個 | 1個 |
自備物品
①.酶標儀(450nm)
②.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
③.37℃恒溫箱
操作步驟
①.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
②.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
③.樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
④.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
⑤.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次 (也可用洗板機洗板)。
⑥.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
⑦.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
結果判斷
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
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