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使用微量量熱法實(shí)時監(jiān)測生物膜代謝

來源:https://symcel.com/real-time-monitoring-of-biofilm-metabolism-using-microcalorimetry/   2020年03月03日 11:23  

使用微量量熱法實(shí)時監(jiān)測生物膜代謝

代謝的直接測量可以為生物膜的研究增加新的維度。盡管存在不同的方法,但是微量量熱法具有許多優(yōu)點(diǎn),可以使其適合各種生物膜工作流程。它是非破壞性的,沒有標(biāo)簽,并且可以實(shí)時執(zhí)行測量,從而可以非常動態(tài)地顯示生物膜樣品的實(shí)際行為。微量量熱法完成后,可將生物膜樣品用于其他測定,如基因表達(dá)或顯微鏡檢查,這是一種使用不同方法關(guān)聯(lián)結(jié)果的有效方法。

生物膜是動態(tài)的

發(fā)表的研究越多,我們就越能看到生物膜是令人難以置信的動態(tài)結(jié)構(gòu)。基因表達(dá),生理學(xué)和生物膜形態(tài)一直在變化。用于生長的標(biāo)準(zhǔn)密度測量無法捕捉到這一點(diǎn),并且更復(fù)雜的方法通常需要進(jìn)行端點(diǎn)測定或使用選擇性染料,這限制了可以收集的信息。微量量熱法提供了一種以非常簡單的方式查看生物膜動態(tài)行為的方法。

微量量熱法以簡單的方式捕獲動態(tài)代謝信息

盡管DIY微量熱法并不簡單,但通常使用商業(yè)儀器。它們通常是臺式機(jī)器,可讀取由許多小孔組成的微量量熱板。換句話說,如果您有一個使用96孔板的實(shí)驗(yàn)性工作流程,則可以使用微量量熱法。演示我們的微量量熱儀的大多數(shù)人,calScreener都對設(shè)置實(shí)驗(yàn)如此容易感到驚訝。他們很驚訝,因?yàn)樵O(shè)置看起來不太像96孔板。主要區(qū)別在于每個孔必須用具有特定張力的蓋密封。起初看起來很棘手,但是使用我們的扭矩扳手很容易。

所有孔都被密封的事實(shí)為微量量熱法帶來了另一個重要優(yōu)勢,它可以輕松地在不同的缺氧條件下測量生物膜。

要求演示

厭氧測量生物膜

在實(shí)驗(yàn)設(shè)置中增加厭氧條件可能會帶來很多限制。在整個實(shí)驗(yàn)過程中,必須制造特殊的腔室和密封以維持厭氧氣氛。由于我們的calScreener板中孔的緊密密封,如果在厭氧室中制備孔,則即使移開板也將保持厭氧狀態(tài)。這意味著您可以在厭氧柜中準(zhǔn)備任何氣氛,并且在整個代謝實(shí)驗(yàn)過程中將自動保持該氣氛。

用真實(shí)樣品進(jìn)行測量

許多評論家抱怨說,手稿中的實(shí)驗(yàn)并不代表“真實(shí)的”生物膜環(huán)境。作為一種方法,微量量熱法可用于任何樣品。研究小組使用孔底部的瓊脂塞,防護(hù)膜生物膜或懸浮在懸浮液中的珠子來運(yùn)行它。當(dāng)涉及形成生物膜的基質(zhì)時,微量量熱技術(shù)非常靈活。例如,如果您正在研究臨床生物膜,則甚至可以直接用患者樣品對從骨骼碎片到定植導(dǎo)管的任何樣品進(jìn)行微量量熱法。實(shí)時微量量熱法的痕跡就像單個微生物的可復(fù)制“指紋”一樣,這意味著它也可以用于診斷。

診斷和即時護(hù)理

微量量熱法是一種有趣的診斷技術(shù),因?yàn)閹缀蹩梢允褂萌魏位颊邩悠贰hb于該技術(shù)可以實(shí)時完成,并且微生物產(chǎn)生*的指紋,因此有意義的是,臨床微生物學(xué)團(tuán)體正在使用微量量熱法同時在患者樣品上測試純化的患者分離株。微量量熱法的優(yōu)勢在于它可以測量代謝而不是生長。許多診斷測定法用于測量細(xì)菌細(xì)胞是否在分裂,但是生物膜中的細(xì)胞可能是活的且具有代謝活性,而不必生長。

代謝不等于增長

微量量熱法zui簡單的應(yīng)用是確定經(jīng)過特定的實(shí)驗(yàn)處理后生物膜是活的還是死的。我們知道,對生物的生存能力進(jìn)行明確監(jiān)測并不能很好地代表生物的生存能力,在生物膜中尤其如此。通過監(jiān)視整體代謝活動,即使微生物群落沒有生長,也可以立即檢測出微生物活動開始出現(xiàn)的跡象。

但是,微量量熱法得到的數(shù)據(jù)非常豐富,以至于可以看到比生物體是活的還是死的更多的信息。由于測量是實(shí)時進(jìn)行的,因此可以地看到代謝何時發(fā)生變化以及對微生物生理和基因表達(dá)有影響的程度。

與其他方法不同,微量量熱法可通過檢測熱量產(chǎn)生的微小變化來直接測量樣品的總代謝量。它不依賴于諸如呼吸之類的代理,并且不受任何特定介質(zhì)或設(shè)置條件的限制。在任何實(shí)驗(yàn)設(shè)置中,微量量熱法都會隨著時間的推移再現(xiàn)生物膜總代謝的圖像。

資料范例

微量量熱法可以檢測哪些微生物?

微量量熱法的靈活性意味著可以測量的唯yi極限是是否可培養(yǎng)。同時檢測革蘭氏陽性和革蘭氏陰性生物當(dāng)然是可能的。我們已經(jīng)嘗試了許多不同的生物,這是一個示例列表,它絕不是詳盡無遺的:

革蘭氏陰性

○ 大腸桿菌

○ 銅綠假單胞菌

○ 肺炎克雷伯菌

○ 鮑曼不動桿菌

○ 沙門氏菌

○ 變形桿菌

革蘭氏陽性

○ 金黃色葡萄球菌

○ 肺炎鏈球菌

○ 枯草芽孢桿菌

○ 海水分枝桿菌

酵母

○ 白色念珠菌

○ 釀酒酵母

使用calScreener監(jiān)測噬菌體感染也是可能的,它在感染噬菌體以及多種生物膜的生命周期中產(chǎn)生了唯yi的指紋。

我們有一些示例數(shù)據(jù),但其中大多數(shù)正在準(zhǔn)備發(fā)布。如果您想討論與您的生物有關(guān)的特定示例,請聯(lián)系我們的一位應(yīng)用科學(xué)家。

聯(lián)系我們的應(yīng)用團(tuán)隊成員

微量熱法用于生物膜

微量量熱法是一種增加生物膜研究規(guī)模的簡單方法。代謝是微生物群落的重要特征,通常使用代理來測量,而代理不能提供真實(shí)情況的完整圖片。該技術(shù)可實(shí)時測量通過代謝產(chǎn)生的熱量,這意味著它*沒有標(biāo)簽,并且易于應(yīng)用于任何生物或?qū)嶒?yàn)裝置。

如果您對該技術(shù)感興趣,但不確定如何將其與您的設(shè)置配合使用,我們目前正在為演示提供應(yīng)用程序。要檢查是否合格并進(jìn)行預(yù)訂,請單擊下面的鏈接。

使用微量量熱法實(shí)時監(jiān)測生物膜代謝

代謝的直接測量可以為生物膜的研究增加新的維度。盡管存在不同的方法,但是微量量熱法具有許多優(yōu)點(diǎn),可以使其適合各種生物膜工作流程。它是非破壞性的,沒有標(biāo)簽,并且可以實(shí)時執(zhí)行測量,從而可以非常動態(tài)地顯示生物膜樣品的實(shí)際行為。微量量熱法完成后,可將生物膜樣品用于其他測定,如基因表達(dá)或顯微鏡檢查,這是一種使用不同方法關(guān)聯(lián)結(jié)果的有效方法。

生物膜是動態(tài)的

發(fā)表的研究越多,我們就越能看到生物膜是令人難以置信的動態(tài)結(jié)構(gòu)。基因表達(dá),生理學(xué)和生物膜形態(tài)一直在變化。用于生長的標(biāo)準(zhǔn)密度測量無法捕捉到這一點(diǎn),并且更復(fù)雜的方法通常需要進(jìn)行端點(diǎn)測定或使用選擇性染料,這限制了可以收集的信息。微量量熱法提供了一種以非常簡單的方式查看生物膜動態(tài)行為的方法。

微量量熱法以簡單的方式捕獲動態(tài)代謝信息

盡管DIY微量熱法并不簡單,但通常使用商業(yè)儀器。它們通常是臺式機(jī)器,可讀取由許多小孔組成的微量量熱板。換句話說,如果您有一個使用96孔板的實(shí)驗(yàn)性工作流程,則可以使用微量量熱法。演示我們的微量量熱儀的大多數(shù)人,calScreener都對設(shè)置實(shí)驗(yàn)如此容易感到驚訝。他們很驚訝,因?yàn)樵O(shè)置看起來不太像96孔板。主要區(qū)別在于每個孔必須用具有特定張力的蓋密封。起初看起來很棘手,但是使用我們的扭矩扳手很容易。

所有孔都被密封的事實(shí)為微量量熱法帶來了另一個重要優(yōu)勢,它可以輕松地在不同的缺氧條件下測量生物膜。

要求演示

厭氧測量生物膜

在實(shí)驗(yàn)設(shè)置中增加厭氧條件可能會帶來很多限制。在整個實(shí)驗(yàn)過程中,必須制造特殊的腔室和密封以維持厭氧氣氛。由于我們的calScreener板中孔的緊密密封,如果在厭氧室中制備孔,則即使移開板也將保持厭氧狀態(tài)。這意味著您可以在厭氧柜中準(zhǔn)備任何氣氛,并且在整個代謝實(shí)驗(yàn)過程中將自動保持該氣氛。

用真實(shí)樣品進(jìn)行測量

許多評論家抱怨說,手稿中的實(shí)驗(yàn)并不代表“真實(shí)的”生物膜環(huán)境。作為一種方法,微量量熱法可用于任何樣品。研究小組使用孔底部的瓊脂塞,防護(hù)膜生物膜或懸浮在懸浮液中的珠子來運(yùn)行它。當(dāng)涉及形成生物膜的基質(zhì)時,微量量熱技術(shù)非常靈活。例如,如果您正在研究臨床生物膜,則甚至可以直接用患者樣品對從骨骼碎片到定植導(dǎo)管的任何樣品進(jìn)行微量量熱法。實(shí)時微量量熱法的痕跡就像單個微生物的可復(fù)制“指紋”一樣,這意味著它也可以用于診斷。

診斷和即時護(hù)理

微量量熱法是一種有趣的診斷技術(shù),因?yàn)閹缀蹩梢允褂萌魏位颊邩悠贰hb于該技術(shù)可以實(shí)時完成,并且微生物產(chǎn)生*的指紋,因此有意義的是,臨床微生物學(xué)團(tuán)體正在使用微量量熱法同時在患者樣品上測試純化的患者分離株。微量量熱法的優(yōu)勢在于它可以測量代謝而不是生長。許多診斷測定法用于測量細(xì)菌細(xì)胞是否在分裂,但是生物膜中的細(xì)胞可能是活的且具有代謝活性,而不必生長。

代謝不等于增長

微量量熱法zui簡單的應(yīng)用是確定經(jīng)過特定的實(shí)驗(yàn)處理后生物膜是活的還是死的。我們知道,對生物的生存能力進(jìn)行明確監(jiān)測并不能很好地代表生物的生存能力,在生物膜中尤其如此。通過監(jiān)視整體代謝活動,即使微生物群落沒有生長,也可以立即檢測出微生物活動開始出現(xiàn)的跡象。

但是,微量量熱法得到的數(shù)據(jù)非常豐富,以至于可以看到比生物體是活的還是死的更多的信息。由于測量是實(shí)時進(jìn)行的,因此可以地看到代謝何時發(fā)生變化以及對微生物生理和基因表達(dá)有影響的程度。

與其他方法不同,微量量熱法可通過檢測熱量產(chǎn)生的微小變化來直接測量樣品的總代謝量。它不依賴于諸如呼吸之類的代理,并且不受任何特定介質(zhì)或設(shè)置條件的限制。在任何實(shí)驗(yàn)設(shè)置中,微量量熱法都會隨著時間的推移再現(xiàn)生物膜總代謝的圖像。

資料范例

微量量熱法可以檢測哪些微生物?

微量量熱法的靈活性意味著可以測量的唯yi極限是是否可培養(yǎng)。同時檢測革蘭氏陽性和革蘭氏陰性生物當(dāng)然是可能的。我們已經(jīng)嘗試了許多不同的生物,這是一個示例列表,它絕不是詳盡無遺的:

革蘭氏陰性

○ 大腸桿菌

○ 銅綠假單胞菌

○ 肺炎克雷伯菌

○ 鮑曼不動桿菌

○ 沙門氏菌

○ 變形桿菌

革蘭氏陽性

○ 金黃色葡萄球菌

○ 肺炎鏈球菌

○ 枯草芽孢桿菌

○ 海水分枝桿菌

酵母

○ 白色念珠菌

○ 釀酒酵母

使用calScreener監(jiān)測噬菌體感染也是可能的,它在感染噬菌體以及多種生物膜的生命周期中產(chǎn)生了唯yi的指紋。

我們有一些示例數(shù)據(jù),但其中大多數(shù)正在準(zhǔn)備發(fā)布。如果您想討論與您的生物有關(guān)的特定示例,請聯(lián)系我們的一位應(yīng)用科學(xué)家。

聯(lián)系我們的應(yīng)用團(tuán)隊成員

微量熱法用于生物膜

微量量熱法是一種增加生物膜研究規(guī)模的簡單方法。代謝是微生物群落的重要特征,通常使用代理來測量,而代理不能提供真實(shí)情況的完整圖片。該技術(shù)可實(shí)時測量通過代謝產(chǎn)生的熱量,這意味著它*沒有標(biāo)簽,并且易于應(yīng)用于任何生物或?qū)嶒?yàn)裝置。

如果您對該技術(shù)感興趣,但不確定如何將其與您的設(shè)置配合使用,我們目前正在為演示提供應(yīng)用程序。要檢查是否合格并進(jìn)行預(yù)訂。

 

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