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HPLC液相色譜柱在使用過程中易出現的問題和解決辦法

來源:Nanologica AB/奧泰立德(成都)科技有限公司   2020年04月27日 15:03  
   HPLC液相色譜柱是一種高效的分析手段,是色譜分析系統的“心臟”,由于被分析樣品種類繁多,加之樣品基質復雜,極易被強保留物質污染。這些強保留物質通常難以洗脫,多次上樣后,聚集在柱頭端,堵塞篩板,甚至可能與填料發生相互作用導致填料變性,這會導致柱效下降,分離度降低和峰型異常等現象。
 
  HPLC液相色譜柱在使用過程中易出現的問題和解決辦法
  在使用中常見的問題就是柱壓升高,如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加,屬于正常現象。但柱壓在使用過程中突然升高(系統管路堵塞及壓力傳感器故障除外),可能的原因有如下幾點:
  (1)柱頭的過濾篩板堵塞或污染;
 
  (2)柱頭的填料被樣品污染;
 
  (3)柱內緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑,形成結晶析出;
 
  (4)流動相pH值過大或過小使固定相結構破壞或溶解。
 
  解決辦法如下:
  (1)如確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染,可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,或者卸下色譜柱頭,將其放在10%的稀硝酸內超聲清洗10分鐘,后再用純水超聲10分鐘,重新裝入色譜柱。
 
  (2)如確定色譜柱頭的填料被污染,將柱頭螺絲卸下,挖出柱內前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔細修復后,重新安裝上柱頭螺絲。
 
  (3)如確定定是鹽結晶,用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內鹽全部溶解,再換高濃度甲醇。
 
  (4)如果因pH值使用不當,很難恢復。

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