造模機(jī)制
人的腦血管阻塞以大腦中動(dòng)脈比較常見(jiàn),在阻斷大鼠大腦中動(dòng)脈后,可引起大腦半球皮層和基底核缺血性損傷,以海馬CA1研究。和人的病理改變相似。
實(shí)驗(yàn)方法
1.大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞
不同品種大鼠在阻斷大腦中動(dòng)脈(middle cerebral artery occlusion,MCAO)后腦梗死面積(體積的大小和恒定性不同,
Sprague-Dawley大鼠比較常見(jiàn)。MCAO引起的腦梗死范圍與年齡無(wú)關(guān),-般用250~ 350g體重的大鼠,雌雄均可,但以雄性為宜。目前比較標(biāo)準(zhǔn)方法是:以12%水合三氯氣vy醛麻醉(350mg/kg, ip大鼠,側(cè)臥位固定于手術(shù)臺(tái)上,頭皮切口,分離顳肌,取外眥和外耳i j連線的中點(diǎn),用牙科鉆或環(huán)形顱鉆鉆開(kāi)顱骨、暴露MCA,在手術(shù)顯微鏡下辨認(rèn)大腦中動(dòng)脈及其分支,在分支的下方即MCA的近段,分離結(jié)扎或燒灼MCA,注意保護(hù)腦組織免受損害,取頸部切口分離結(jié)扎同側(cè)的頸總動(dòng)脈
(common carotid artery,CCA)。電凝時(shí)為避免電凝不*所致的出血,盡里將MCA挑起,使血管內(nèi)血里減少。另外,為保護(hù)周?chē)M織免受灼傷,可用濕棉球保護(hù)。阻斷大腦中動(dòng)脈后用小塊肌肉組織輕敷于顱窗上,然后逐層縫合傷口,術(shù)后回籠詞養(yǎng)。以上過(guò)程均在室溫恒定(24~ 25C )情況下進(jìn)行,以利于評(píng)價(jià)腦缺血的程度。然后用- -小塊肌肉輕敷顱骨窗口,逐層縫合后,將動(dòng)物放回籠中。
模型特點(diǎn)
本法手術(shù)成功率高,缺點(diǎn)為操作較為復(fù)雜。根據(jù)每批動(dòng)物MCA的側(cè)支豐富程度不同,產(chǎn)生梗死面積約在15%~ 24%。阻斷MCA的部位與梗死面積有很大關(guān)系,將豆?fàn)罴y狀體動(dòng)脈和皮層分支與MCA遠(yuǎn)端的側(cè)支循環(huán)分開(kāi),在MCA開(kāi)口處與大腦下靜脈之間,或嗅束外端2mm接近MCA部位燒灼MCA較長(zhǎng)-段,則可引|起較恒定的大腦皮層和基底神經(jīng)核團(tuán)的梗死。若燒灼靠近嗅束很短- -段MCA,則只有2/3動(dòng)物出現(xiàn)腦梗死。
2.大鼠短暫性MCAO(缺血-再灌)模型
體重350~ 450g大鼠,麻醉后大鼠仰臥固定,頸部正中切口約2cm,在肩胛舌骨和胸鎖乳突肌形成的三角處暴露右(或左)側(cè)CCA及其分支頸外動(dòng)脈(external carotid artery, ECA)和頸內(nèi)動(dòng)脈<(intemal carotid artery,ICA)。結(jié)扎ECA的分支枕動(dòng)脈、甲狀腺_上動(dòng)脈及ECA終末支,分離ICA的顱外分支翼突腭動(dòng)脈。夾閉CCA、ICA,自ECA插入- -端加熱成圓珠狀(直徑<0.3mm)的尼龍線并將其導(dǎo)入ICA,松開(kāi)ICA夾,繼續(xù)將尼龍線插入顱內(nèi)至大腦中動(dòng)脈的起始部位,感到阻力明顯時(shí),即可阻斷
MCA,此時(shí)插入的尼龍線長(zhǎng)約20mm(自頸內(nèi)外動(dòng)脈分叉處算起)。若要研究缺血再灌注,由頸外動(dòng)脈進(jìn)入大腦中動(dòng)脈,然后再將尼龍線往回抽到頸外動(dòng)脈處,就可進(jìn)行再灌注。
模型特點(diǎn)
本方法在不開(kāi)顱的情況下,造成MCA供血區(qū)缺血。因其簡(jiǎn)單易操作,重現(xiàn)性好,易掌握,并可進(jìn)行再灌注,近年應(yīng)用較普遍,并被推廣應(yīng)用到SHR大鼠、小鼠和沙鼠上。
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