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細(xì)胞污染的來源有哪些

來源:愛必信(上海)生物科技有限公司   2022年09月08日 09:18  
  細(xì)胞中如果污染細(xì)菌,最常見的有枯草桿菌等革蘭陽性菌以及大腸桿菌、假單孢菌等革蘭陰性菌,其中又以白色葡萄球菌較常見。培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后,會很快出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,pH 改變。
  也有少數(shù)培養(yǎng)液肉眼觀察無多少改變,只能在鏡下發(fā)現(xiàn)菌體才知污染。所以,每天應(yīng)仔細(xì)觀察。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變,胞內(nèi)顆粒增多、增粗,最后變圓脫落死亡,造成實(shí)驗(yàn)失敗和細(xì)胞株(系)丟失。
  細(xì)胞污染的來源
  無菌觀念薄弱,穿戴不注意
  進(jìn)細(xì)胞房不換鞋,不戴口罩,不戴手套,是細(xì)胞房的大忌諱!有更嚴(yán)格的細(xì)胞房連帽子都要戴上。為什么呢?換鞋是為了隔離真菌。戴口罩是為了防止口腔支原體不會污染細(xì)胞了。不戴手套,根本就清除不掉你手上的細(xì)菌真菌,要不你試試看拿火燎一下你的手,焦了才算滅菌。
  紫外線和酒精滅菌,不能亂用
  能滅菌,但是紫外和酒精最多只能滅細(xì)菌,對真菌傷害很小。你不戴手套,僅用噴壺噴手是沒有什么用的。超凈臺為什么盡量要用酒精棉球而不是用酒精噴壺呢?因?yàn)橛镁凭耷虻脑挘梢栽跍缇耐瑫r把菌體從手上擦下去。而噴壺只能短暫滅菌而已,所以要多用棉球,少用噴壺。
  使用生物安全柜,別超安全線
  生物安全柜的玻璃窗是有警戒線的,超過這個警戒線,生物安全柜的風(fēng)簾就起不到太大作用,且會引入室內(nèi)空氣中的真菌,比如你的臭鞋里的酵母啥的。還會讓你給細(xì)胞送溫暖的呼吸里,自動帶上支原體。
  拿細(xì)胞培養(yǎng)瓶的時候不注意操作
  用細(xì)胞培養(yǎng)瓶來培養(yǎng)的時候,最忌諱的是你拿瓶子的時候,手拿著有蓋子的那一面。因?yàn)橐话銇碚f瓶蓋開關(guān)是最容易接觸到瓶口的,你手拿著培養(yǎng)瓶,那手的虎口夾縫里所含有的真菌很容易就接觸到瓶蓋上,一旦造成污染,就是很嚴(yán)重的。
  實(shí)驗(yàn)用品亂擺放
  生物安全柜里操作的時候,門前最忌諱堆一堆雜七雜八的東西,槍頭盒、血清、管子,培養(yǎng)皿、移液器、酒精噴壺、酒精燈,堆了一大堆。有的都堵住了安全柜門前的出風(fēng)口。一來會導(dǎo)致操作起來并不是井井有條,會導(dǎo)致動作幅度過大,擾亂氣流。二來這些東西一旦擋住風(fēng)口,也會擾亂生物安全柜的氣流,氣流變化會導(dǎo)致外部不潔凈的空氣流入,也同樣會導(dǎo)致生物安全柜的潔凈作用失效。
  不注意清潔水浴鍋
  水浴鍋是比較容易忽視的,復(fù)蘇細(xì)胞的時候,37℃,對細(xì)菌真菌來說這就是溫床啊。復(fù)蘇完,濕漉漉的凍存管,任你再怎么噴酒精也并沒有什么意義了。那要怎么辦,水浴鍋一來是定期清潔,二來是加一些抑菌劑
  水盤污染
  培養(yǎng)箱的水盤也是坐擁37℃溫床的水環(huán)境。水盤里若是飄著特別大的一塊塊霉斑。一污染就一箱子全報廢了,培養(yǎng)箱要定期用0.1%的新潔爾滅或者84清洗(交替使用,防止微生物耐藥)。水盤也一樣,水盤中加入飽和的磷酸氫二鈉可以有效預(yù)防細(xì)菌真菌,但是需要定期加入去離子水防止析出。
  滅菌滅不好
  細(xì)胞房所使用的槍頭,必須要經(jīng)過濕熱滅菌, 用報紙包裹好槍頭,是因?yàn)闇缇佉话阍诩?xì)胞房外面,所以要保證內(nèi)部槍頭盒結(jié)晶。烤干是為了防止內(nèi)部有水分,當(dāng)你開啟槍頭盒后,有水的地方更容易被霉菌的孢子所接觸附著,也就更容易污染。所以這個也必須要注意!

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