亚洲AV成人片无码网站玉蒲团,男人10处有痣是富贵痣,AV亚洲欧洲日产国码无码苍井空,日韩午夜欧美精品一二三四区

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養箱


化工儀器網>技術中心>儀器文獻>正文

歡迎聯系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

標記鬼筆環肽在觀察細胞骨架時的運用

來源:上海易佰聚經貿有限公司   2009年04月22日 17:32  

鬼筆環肽(phalloidin 鬼筆鵝膏素)
 

 

  從一種毒性菇類中分離的劇毒生物堿,C35H48N8O11S。無色,細針狀結晶,系從毒蕈類鬼筆鵝膏(Amanita phalloides)中得到的有毒的環狀七肽。與鵝膏蕈堿(amanitin)一起存在,毒性比鵝膏蕈堿弱,對小鼠的致死劑量是50微克,對人體也有很強的毒性,可引起流涎、嘔吐、便血、發紺、痙攣、肌肉攣縮,以致死亡。它同細胞松弛素B的作用相反, 只與聚合的微絲結合, 而不與肌動蛋白單體分子結合。它同聚合的微絲結合后, 抑制了微絲的解體, 因而破壞了微絲的聚合和解聚的動態平衡。鬼筆環肽可以與聚合的微絲結合的特殊性質使得它具有一個頗富前景的用途:通過讓這種毒素吸附于熒光染料上面,研究人員可以研究細胞的內部工作機制,窺視細胞如何分裂。通過這些觀察,他們可以揭開癌癥工作機制和組織生長之謎。
 

 

  美國加州大學圣克魯斯分校的兩位化學家斯科特·洛基和勞拉·舒利斯科(Laura Schuresko)利用一種稱為固體階段合成(solid-phase synthesis)的手法,制造出這種致命物質。他們不是將幾種化學物質放入燒瓶混合,讓它們自由飄浮,而是在化學反應期間對其中一種化學物質進行適當約束,這樣一來,研究人員在復雜的化學反應過程中可以更好地對其進行控制。
 

 

  


 

 

  FITC和Rhodamin等熒光物質標記的鬼筆環肽可特異的與真核細胞的F-acting結合,從而顯示微絲骨架在細胞中的分布。鬼筆環肽的配制:0.1mg鬼筆環肽溶于1ml無水甲醇(也可用DMSO或無水乙醇溶解)配成貯存液,可在-20度避光的條件下長期保存,工作液的濃度為5ug/ml,由貯存液加生理鹽水PBS稀釋20倍即可。
 

 

  染色程序:
 

 

  生理鹽水PBS清洗細胞2次,每次10分鐘;
 

 

  3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分鐘,生理鹽水PBS清洗細胞2次;
 

 

  加入5ug/ml的FITC-鬼筆環肽室溫染色30-60分鐘,夏季時間可以短一些,生理鹽水PBS清洗細胞2次;
 

 

  DAPI或hoechst33258染細胞核10分鐘,生理鹽水PBS清洗細胞2次;
 

 

  吸去多余水分,加熒光封片液(中性或偏堿性緩沖液加等量甘油),蓋上蓋玻片,熒光或共聚焦顯微鏡下觀察。
 

 

  注意事項:
 

 

  鬼筆環肽的分子量小,很容易通過細胞,不需要對細胞進行冷丙酮和TRITON X-100處理。
 

 

  藥品價格昂貴,0.1mg的售價接近兩千元,要節約使用。
 

 

  毒性較大,戴上手套操作。
 

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
企業未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618