一、背景原理分析:
1.生物分子表面大都含或強或弱的疏水區域,在不同環境下,與各種疏水介質產生不同強弱和結合。
2.高離子強度可加強疏水性。和離子交換剛剛相反,高鹽吸附,低鹽洗脫。經洗脫樣品又可直接或稍加稀釋后上。
3.其它層析柱,做為連接下游和層析步驟的橋梁。并可*取代傳統的鹽析沉淀技術,更符合工業生產要求。
4.比反相層析介質的配體密度低許多,無需有機溶液劑洗脫,保存生物活性。配體種類繁多,提供寬廣的選擇性。
二、疏水層析也稱疏水作用層析(hydrophobicinteractionchromatographyHIC)。蛋白質表面一般有疏水與親水基團,疏水層析是利用蛋白質表面某一部分具有疏水性,與帶有疏水性的載體在高鹽濃度時結合。在洗脫時,將鹽濃度逐漸降低,因其疏水性不同而逐個地先后被洗脫而純化,可用于分離其它方法不易純化的蛋白質。
三、HIC配基基團一般為丁基、苯基、辛基,其碳鏈分別為C4,C6(苯環)和C8。一般來說,碳鏈越長,表面疏水性越高。影響疏水作用的因素包括:鹽濃度,溫度,pH,表面活化劑和有機溶劑。疏水層析的應用與離子交換層析的應用剛好互補,因此,可以用于分離離子交換層析很難或不能分離的物質。
四、優勢特點:
可提供從分析到全生產規模的所有包裝尺寸;
化學穩定的瓊脂糖基質;
可在高和低配體密度、交替交聯水平和不同珠粒尺寸下生產,以優化分離介質;
所有版本都可以按比例放大并生產,以供GMP使用。
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