寡核苷酸 (oligos) 是一類特殊的治療藥物,包括 RNA、DNA 及其結構類似物,對許多疾病都有治療效果。最近的新冠疫情,mRNA 疫苗的火爆極大的加速了對這類新型生物技術的發展,合成寡核苷酸備受生物制藥行業關注,已經有好幾款候選藥物獲批上市或進入臨床試驗后期階段。從結構上來看,寡核苷酸是單鏈或雙鏈線性分子,含有通過磷酸二酯鍵結合的核苷酸殘基。與小分子藥物和蛋白質類藥物相比,這類聚陰離子分子的化學和物理性質具有的性質,給分析表征帶來了特殊挑戰。
目前,LC-MS 仍然是表征寡核苷酸的金標準,其中使用離子對 (IP) 試劑的反相 LC 應用尤為廣泛。這些方法不僅要用到離子對試劑(ion pairing reagent),分析時還需耗費較長時間來平衡系統和色譜柱,導致寡核苷酸樣品的分析通常需要專門的 LC/MS 系統。因此,結合正交分離方法與高分辨率質譜開發簡單的寡核苷酸分析方法很有必要。ZipChip CE-MS基于毛細管區帶電泳與電噴霧電離的無縫結合,使得樣品可以在無需離子對試劑的條件下,完成快速高效的分離,并進入質譜實現結構表征。
ZipChip 裝置是質譜儀的前端入口, 它可以運行毛細管區帶電泳 (CZE) 分離,利用微流體技術天然的速度優勢提高 CE 分離效率。ZipChip 裝置可無縫連接多款商用質譜儀(Thermo Fisher、Bruker 和 SCIEX)。微芯片的結構設計避免了傳統毛細管類型的 CE-ESI 接口存在的死體積、樣品稀釋和譜帶展寬等缺陷,保證了 CE 分析過程中的速度與靈敏度。同時分離分離通道表面的特殊涂層處理減少了電滲流(EOF)帶來的影響,保證分離的可靠性和重現性。
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