今年一月份恒瑞醫藥自主研發的鹽酸伊立替康脂質體注射液(商標名:越優力)獲批上市,公開資料顯示,這是恒瑞醫藥在現有鹽酸伊立替康注射液及其凍干粉針劑的基礎上,通過改變劑型開發出的一種可靶向分布于瘤體的新制劑。脂質體制劑的設計可保護伊立替康不會被早期轉化為活性代謝物SN-38,有助于伊立替康在體循環中保持更長時間,增加藥物在腫瘤內的沉積和接觸,增強對腫瘤生長的抑制作用。
正是由于脂質體能夠將毒副作用大、在血液中穩定性差、降解快的藥物包裹,并將藥物濃集于病灶部位達到緩釋或靶向給藥的目的,正作為藥物載體被應用于小分子藥物、蛋白質藥物、核酸藥物和顯像劑等。目前,全球共有14個脂質體產品獲批上市,分別是:
脂質體最早由英國學者于1965年發現,是脂質自組裝形成的雙層(單層)和/或同心多個雙層(多層)封閉中心水腔的藥物囊泡。脂質體的結構與細胞膜極其類似,使其具有高度的生物相容性和生物可降解性,將藥物包裹,可以提高藥物的穩定性,降低藥物的毒性,提高給藥劑量。同時,脂質體的雙親性磷脂形成的雙分子層表面,可以通過物理或者化學手段,與配體或者其他功能基團進行結構修飾使其具有組織靶向性。另外,通過改變雙分子層表面的電荷,可用于DNA和RNA藥物的包載和遞送。
脂質體的結構(來源:醫學百科)
脂質體藥物根據結構可將其分類為單室、多囊與多層。單室脂質體是目前最常見的一種結構,只具有一個可以載藥的空腔。如鹽酸阿霉素脂質體(Doxil),由于脂質體外殼的存在,鹽酸阿霉素在體內的穩定性更高,藥物濃度下降較慢,從而延長了其藥效。此外,脂質體外殼還可以減少鹽酸阿霉素對心臟和造血系統的毒性。多囊脂質體與多層脂質體可以分別比喻為“石榴”和“洋蔥”,即多囊脂質體具有多個蜂巢狀排列的空腔,而多層脂質體具有多個層累堆疊的空腔,均具有出色的緩釋效果。如最早由美國Pacira公司研制的Bupivacaine脂質體注射液,采用多囊脂質體藥物遞送系統,可將鎮痛效果延長至數天。
由于脂質體藥物的組成、結構、尺寸、表面性質、藥物包封率、載藥量、藥物存在形式等可顯著影響其穩定性、藥物釋放以及脂質體-生物膜之間的相互作用,進而影響藥物的安全性和有效性。因此,需對脂質體藥物的質量進行深入研究和有效控制。丹納赫生命科學擁有一些列脂質體藥物的表征方案,可對脂質體進行多方位的分析。
對于脂質體藥物的形態、粒徑及其分布,常采用電鏡、激光散射法或激光掃描法測定。丹納赫生命科學旗下徠卡顯微系統的EM GP2 自動投入冷凍儀,可對脂質體樣本進行冷凍透射電鏡前的載網冷凍處理,采用冷凍透射電鏡對脂質體進行觀察可以減少電子束對樣品的損傷,降低樣品的形變,獲得更真實的樣品形貌。EM GP2 的紅外線傳感器能夠精確控制濾紙吸附,使樣品分布均勻,結合單面平行吸附,能夠在不破壞碳膜的情況下,獲得更大面積的載網可用范圍。
徠卡顯微系統的EM GP2全自動快速投入冷凍儀
對脂質體藥物進行載網冷凍處理
(來源:電子顯微學報2012)
包封率是脂質體藥物具有的質量屬性,它是指被包裹物質(如某藥物)在脂質體懸液中占藥物總量的百分量。丹納赫生命科學旗下貝克曼庫爾特生命科學的分析型超速離心機AUC可通過離心沉降法進行脂質體藥物包封率的檢測。如對阿霉素脂質體的檢測,AUC通過對阿霉素脂質體、游離阿霉素以及空脂質體的不同紫外吸收波長進行包封率的測定和計算。AUC作為一種遵循第一性原理、使用樣品原始溶液的方法,通過檢測脂質體藥物沉降系數分布,還可得到樣品的純度信息。
貝克曼庫爾特生命科學的分析型超速離心機
AUC對阿霉素脂質體的包封率檢測
正是由于脂質體藥物的質量屬性,它在注入血液后,會存在脂質體包封的藥物、非包封的藥物和空脂質體三種形式。根據2015年FDA指南草案,要批準具有持續釋放功能的新脂質體制劑,必須考慮三個標準:脂質體載體本身的清除率,被包封的藥物從脂質體載體中釋放的速率以及自由藥物釋放后的清除和代謝。因此,檢測脂質體相關藥物和游離(或非脂質體)藥物的血漿濃度,對于脂質體制劑的藥代動力學研究和安全性評價是必要的。而且,需要一種合適且可靠的樣品制備方法,將未包封藥物與脂質體包封藥物分開。
SPE法是常見的前處理方法,當樣品加載到SPE柱中時,未封裝的藥物會保留在SPE柱上,脂質體成分會通過并收集在洗脫液中。然后用有機溶劑洗脫柱,以收集未包封的藥物,洗脫液中的脂質體需要進一步處理以破壞脂質體并釋放出藥物用于后續分析。
SPE法進行脂質體藥物前處理的典型步驟
丹納赫生命科學旗下艾杰爾-飛諾美擁有多種不同類型的SPE柱及96孔微孔板,可用于脂質體藥物的制劑以及生物學分析前處理。其中SPE微孔板只需要25µL的洗脫體積,比傳統96孔板節省時間,并且能夠減少熱敏感型化合物回收率損失。
艾杰爾-飛諾美的SPE產品
由于理化結構帶來的*生物相容性和可編輯性帶來的靶向給藥潛力,脂質體遞送受到廣泛關注,并且在臨床上有進一步的應用。但是其工藝流程、保存、安全性等方面還具有一定的挑戰,企業需要不斷創新,加強產品研發和質量控制,才能在市場中取得競爭優勢。
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