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可見(jiàn)分光光度計(jì)是一種測(cè)量光強(qiáng)度的儀器,通常用于測(cè)量可見(jiàn)光下的吸收、透射和反射現(xiàn)象。它是分析化學(xué)和生化領(lǐng)域中常用的測(cè)量技術(shù)之一,廣泛應(yīng)用于藥物研究、化工分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)、金屬檢測(cè)等領(lǐng)域。
工作原理:
光源:通常采用白熾燈或氙氣燈作為光源,發(fā)出的光經(jīng)過(guò)單色器后變成單色光。
光路:樣品被置于一個(gè)透明的玻璃或塑料池中,并通過(guò)光路使得光線(xiàn)通過(guò)樣品。樣品溶液能夠吸收某些特定波長(zhǎng)的光,而不吸收其他波長(zhǎng)的光。
檢測(cè):檢測(cè)器測(cè)量傳入和穿過(guò)樣品的光的強(qiáng)度,并將兩者之間的差異轉(zhuǎn)化為樣品吸光度值。吸光度值與樣品中目標(biāo)化合物的濃度成正比。
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液來(lái)制作一條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),并根據(jù)該曲線(xiàn)確定未知樣品的濃度。
在使用可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí),需要注意以下幾點(diǎn):
預(yù)熱:為使測(cè)定穩(wěn)定,需將儀器預(yù)熱一段時(shí)間,通常為20分鐘。
比色皿使用:使用時(shí)應(yīng)正確拿取和清洗比色皿,避免損壞其透光面。
光路保護(hù):在不測(cè)定時(shí),應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開(kāi),使光路切斷,以保護(hù)光電管。
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