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在生物醫學領域，單克隆抗體（mAbs）因其特異性高、純度好以及可大規模生產的特點，在診斷、治療和研究中扮演著核心角色。單克隆篩選，作為單克隆抗體開發流程中的關鍵環節，確保了最終產品的均一性和有效性。本文將深入探討它的過程、技術革新以及在現代生物制藥中的重要地位。
意義
目標是從混合的細胞群體中識別出能夠穩定表達目標抗體的單一細胞系。這一過程之所以至關重要，是因為即使是在經過融合的雜交瘤細胞中，也并非所有細胞都能產生所需的抗體，或是產生的抗體效價和特異性不足。通過篩選，科學家們能夠挑選出那些能夠穩定、高效且特異地產生目標抗體的細胞克隆，為后續的大規模生產和臨床應用奠定基礎。
篩選流程
通常涉及兩個主要階段：
初次篩選：此階段的主要目標是從雜交瘤細胞群中篩選出能夠產生抗體的細胞。這通常通過檢測細胞培養上清液中是否存在針對特定抗原的抗體來完成。技術手段包括酶聯免疫吸附測定（ELISA）、流式細胞術（FACS）等。
二次篩選：在初次篩選中選出的陽性細胞克隆還需要進一步的驗證，以確保它們能夠穩定且一致地產生所需的抗體。這一步驟可能涉及多次克隆化，直至獲得單克隆細胞系，這些細胞系在長時間的培養中保持其表型穩定，且抗體產量和質量滿足要求。
技術革新
近年來，單克隆篩選技術經歷了顯著的革新，提高了篩選的效率和準確性：
自動化與高通量篩選：現代實驗室越來越多地采用自動化平臺，如高通量細胞分選系統，能夠在極短的時間內處理大量樣本，顯著加快了篩選速度。
熒光激活細胞分選（FACS）：結合熒光標記的抗體，FACS能夠基于細胞表面標記物或細胞內抗體的表達水平，高精度地分離出目標細胞。
單細胞測序：這一技術允許對單個細胞的基因表達譜進行深度分析，有助于識別和表征那些具有功能的細胞克隆。
基因編輯：通過精確修改細胞基因組，科學家可以創建具有特定抗體表達特征的細胞系，進一步優化篩選過程。
在生物制藥中的作用
單克隆篩選是生物制藥研發流程中的一項核心技術。它不僅確保了單克隆抗體的均一性和可重復性，還促進了個性化醫療的發展，使針對特定疾病亞型的療法成為可能。
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