稱取魚肉試樣2 g(精確至0.01 g)于50 mL離心管中，加入15 mL乙腈，在垂直振蕩儀中以1 000 r/min振蕩5 min。然后，以10000 r/min離心5 min，將上清液轉(zhuǎn)入另一50 mL離心管中。對(duì)殘?jiān)偌尤?5 mL乙腈，重復(fù)提取并離心一次，合并兩次上清液，并用氮?dú)獯蹈伞＜尤? mL 5%(體積分?jǐn)?shù))乙酸水溶液，渦旋1 min。用3 mL甲醇和3 mL水依次活化MCX萃取柱，取備用液過柱，用5 mL 5%(體積分?jǐn)?shù)，下同)乙酸水溶液洗滌，抽干，再用5 mL 10%氨水甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，并在40 ℃下用氮?dú)獯蹈伞Ｓ?.0 mL 20%乙腈水溶液溶解殘?jiān)ㄟ^0.22 μm濾膜過濾，待上機(jī)測(cè)試。

2.2實(shí)驗(yàn)方法

V20垂直振蕩器，可以根據(jù)需要設(shè)置振蕩頻率，無需人工操作。比較提取5min振動(dòng)頻率分別為500、800、1000、1200、1500 次/min的提取效率，每個(gè)頻率稱取3個(gè)平行質(zhì)控樣，按照2.1樣品處理的方法進(jìn)行樣品提取回收率試驗(yàn)。圖1為不同振蕩頻率提取的魚肉粉中地西泮殘留量回收率，從圖1中可以看出，當(dāng)振動(dòng)頻率高于1000次/min時(shí)，提取效率無明顯差別，因此提取頻率采用1000次/min。

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圖1   不同振蕩頻率提取的魚肉粉中地西泮殘留量回收率

比較超聲提取法、渦旋提取法和全自動(dòng)垂直振蕩儀提取法對(duì)質(zhì)控樣中地西泮提取的提取回收率，提取時(shí)間分別為5、10、15、20、30 min。按照2.1樣品處理的方法進(jìn)行樣品提取回收率試驗(yàn)。圖2為三種不同提取方式的魚肉粉中地西泮回收率，從圖2可以看出，超聲法提取效率較低，可能是塑料離心管阻礙了超聲波的傳遞，渦旋法提取效率次之，全自動(dòng)垂直振蕩提取法效率非常高。綜合以上，選擇全自動(dòng)垂直振蕩提取法，以實(shí)現(xiàn)批量操作，省時(shí)省力，操作簡(jiǎn)單。

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圖2   三種不同提取方式的魚肉粉中地西泮回收率