產品參數(shù)
試劑組分(WLB8201KITWLB8201KIT48T/盒) | |||
組成 | 規(guī)格 | 數(shù)量 | 功能 |
A buffer | 1.6ml | 1管 | 主要為穩(wěn)定蛋白/酶,性能的緩沖體系 |
B buffer | 0.15ml | 1管 | 主要為鎂離子等激活體系 |
正對照模板 | 0.1ml | 1管 | 主要是陽性質粒模版為檢驗試劑盒的有效性 |
正對照引物MIX | 0.06ml | 1管 | 主要是正對照模版的引物組合 |
凍干粉試劑 | 8T/排,16T/包 | 3包 | 蛋白/酶體系的試劑工藝:凍干粉、凍干微球 |
注 Tips:
1. 高溫變性不能有效去除蛋白,可能對產物分析造成影響;
2. 市場上部分擴增產物純化試劑盒不適用,可能造成假陰性結果。
原理概述 :
本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴增技術:在常溫恒溫下(一般為39oC~42oC),在輔助蛋白和單鏈結合蛋白的幫助下,重組酶和引物形成復合體;進行同源搜索并結合目的同源域,此時在該同源位置形成D-loop區(qū)并開始進行鏈交換;伴隨著重組酶從復合體上解離,聚合酶也結合到引物的3’末端,開始鏈的延伸。
引物設計 :
建議使用長度在 30-35 bp 的引物,引物過短會影響擴增速度和檢測靈敏度;引物設計避免形成二級結構而影響擴增;擴增子長度建議在 150-300 bp,通常不超過 500 bp。
由于試劑盒靈敏度非常高,在進行反應時請注意避免核酸污染,并設置空白對照;(圖片為凝膠電泳法顯示結果)
產品特點及優(yōu)勢:
本試劑盒具有靈敏度高、特異性強、反應時間短(僅需 30 min)等優(yōu)點;反應組分為干粉狀態(tài),操作簡便,易于保存。使用金屬浴、水浴鍋等即可進行反應操作;無需購買 PCR 儀等價格高昂的設備。
適用于實驗室級別的DNA擴增以及其他檢測用途的DNA擴增使用。
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