前言:
白酒是世界六大蒸餾酒之一,是以糧谷為主要原料,以大曲、小曲、麩曲、酵母等作為發酵劑,經蒸煮、發酵、蒸餾、勾調等多道工藝釀造而成。白酒的釀造需經歷多種微生物混合發酵,微生物代謝會產生各種功能成分,如γ-氨基丁酸和核苷類物質等。其中,核苷類物質具有增強免疫、抗氧化、抗癌等生物活性,具有一定的保健作用。腺苷能顯著提高細胞活力,在機體的中樞神經系統、心血管系統和凝血系統中發揮重要作用。尿苷具有促進睡眠和抗癲癇的作用,改善記憶功能。
本篇文章采用了皖儀科技高效液相色譜儀LC3400系列配置紫外檢測器對白酒中核苷類物質含量進行檢測。系統適用性實驗結果顯示,尿苷和腺苷色譜峰的理論塔板數均在7000以上。核苷類混合標準溶液重復進樣6次,尿苷保留時間RSD值為0.0537%,峰面積RSD值為0.3859%。腺苷保留時間RSD值為0.2240%,峰面積RSD值為0.3866%。重復性較好。尿苷和腺苷的線性良好,線性相關系數均>0.999,尿苷的檢出限為0.67 μg/L,定量限為2.23 μg/L;腺苷的檢出限為15.63 μg/L,定量限為52.09 μg/L。以某品牌白酒作為測試樣品,該品牌白酒未檢測出尿苷和腺苷,檢測結果正常。說明了該方法配備皖儀科技LC3400系列儀器滿足對白酒中核苷類物質含量的檢測需求。
關鍵詞:尿苷;腺苷;高效液相色譜法;紫外檢測器;白酒。
1. 實驗方法
1.1儀器配置
1.2實驗材料及輔助設備
甲醇:色譜純;
尿苷標準品;
腺苷標準品;
分析天平;
超聲波清洗機;
渦旋混合器;
0.22μm水系濾膜。
1.3測試條件
1.4溶液配制
1.4.1核苷類物質標曲實驗工作液
精密稱取尿苷標準品1.00 mg和腺苷標準品10.00 mg置于同一 10 mL容量瓶中,用10%甲醇水溶解并定容,可得尿苷濃度為100μg/mL和腺苷濃度為 1000μg/mL的混合標準母液。再用10%甲醇溶液倍比稀釋成混合標準系列,可得,核苷類混合標準工作溶液中尿苷濃度分別為100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2 μg/mL、1 μg/mL、
0.5 μg/mL;腺苷濃度分別為1000 μg/mL、500 μg/mL、250 μg/mL、100 μg/mL、50 μg/mL、20 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL。
2.結果與討論
2.1系統適用性
說明:由上述譜圖可見,尿苷色譜峰的保留時間為4.953 min,腺苷色譜峰的保留時間為17.245 min,理論塔板數均在7000以上。
2.2標準曲線
說明:本次測試的核苷類混合標準工作溶液中尿苷濃度分別為100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2 μg/mL、1 μg/mL、0.5 μg/mL;腺苷濃度分別為1000 μg/mL、500 μg/mL、250 μg/mL、100 μg/mL、50 μg/mL、20 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL。尿苷和腺苷的標準曲線線性范圍較好,線性相關系數均>0.999,滿足實驗分析需求。
2.3 重復性
說明:核苷類混合標準溶液(尿苷25 μg/mL,腺苷250μg/mL)重復進樣6次,尿苷保留時間RSD值為0.0537%,峰面積RSD值為0.3859%。腺苷保留時間RSD值為0.2240%,峰面積RSD值為0.3866%。重復性較好。
2.4 檢出限
說明:以信噪比(S/N)為3確定檢出限(LOD),尿苷檢出限為0.67 μg/L,腺苷檢出限為15.63 μg/L。以信噪比(S/N)為10確定定量限(LOQ),尿苷定量限為2.23 μg/L,腺苷定量限為52.09 μg/L。
2.5 樣品測試
選擇某品牌白酒作為基質,準確量取10 mL酒樣經0.22μm水系濾膜過濾,進樣量10 μL,供高效液相色譜儀測定。
說明:該品牌白酒未檢測出尿苷和腺苷,檢測結果正常。
2.6 注意事項
(1)在制備相關溶液時需要注意佩戴好實驗室防護用品。
(2)相關溶液配制好后置于2-8℃保存。
3.結論
本篇文章采用了皖儀科技高效液相色譜儀LC3400系列配置紫外檢測器對白酒中核苷類物質含量進行檢測。系統適用性實驗結果顯示,尿苷和腺苷色譜峰的理論塔板數均在7000以上。核苷類混合標準溶液重復進樣6次,尿苷保留時間RSD值為0.0537%,峰面積RSD值為0.3859%。腺苷保留時間RSD值為0.2240%,峰面積RSD值為0.3866%。重復性較好。尿苷和腺苷的線性良好,線性相關系數均>0.999,尿苷的檢出限為0.67 μg/L,定量限為2.23 μg/L;腺苷的檢出限為15.63 μg/L,定量限為52.09 μg/L。以某品牌白酒作為測試樣品,該品牌白酒未檢測出尿苷和腺苷,檢測結果正常。說明了該方法配備皖儀科技LC3400系列儀器滿足對白酒中核苷類物質含量的檢測需求。
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