【原理概述】 

本試劑盒基于一種常溫恒溫核酸快速擴增技術：在常溫恒溫下（一般為 39 oC~42 oC）， 在輔助蛋白和單鏈結合蛋白的幫助下，重組酶和引物形成復合體；進行同源搜索并結合目的同源域，此時在該同源位置形成D-loop 區并開始進行鏈交換；伴隨著重組酶從復合體上解離，聚合酶也結合到引物的 3’末端，開始鏈的延伸。依賴nfo 酶的作用，加入根據模板設計的特異的分子探針，使用膠體金技術（三明治夾心法）可以對最終結果進行檢測。

【產品特點】 

本試劑盒具有靈敏度高、特異性強、反應時 間短（僅需 15 min）等優點，反應組分為干粉狀態，操作簡便，易于保存。 本試劑對設備要求低，金屬浴、水浴鍋等即 可進行反應操作，無需購買 PCR 擴增儀等 價格高昂的專屬設備。

【引物設計】 

建議使用長度在30-35 bp 的引物，引物過短會影響擴增速度和檢測靈敏度；下游引物的 5’端標記一個修飾基團（常用生物素）。引物設計避免形成二級結構而影響擴增；擴 增子長度建議在150-500 bp。

【膠體金探針設計】

在上下游引物中間，設計一段長度為46-52nt 與目的片段互補的序列；5’端修飾一個抗原 標記（典型 FAM）；在 5’端和 3’末端的中部 位置標記一個 dSpacer（四氫呋喃，THF）， 作為 nfo 的識別位點；3’末端標記一個修飾 基團，例如胺基、磷酸基團或 C3-Spacer 等。

【試劑盒儲存】 

1．儲存條件：儲存溫度 ≤ -20 °C 恒溫環境， 避光保存，避免重壓； 

2．產品有效期：14 個月； 

3．生產日期見外包裝。

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