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長時程活細胞成像Incucyte®是一款革命性的細胞成像設備，能夠在培養箱內實現無限時間的連續觀察。其傻瓜式的實驗設置和分析流程，以及精準的細胞指標計算，使得眾多用戶對其愛不釋手。Incucyte®在細胞水平的體外實驗中有著廣泛應用。
事實勝于雄辯，用文章數量說話！在2024年第三季度，陳老師下載了數十篇包含Incucyte®數據的國內文章（文獻列表在文末哦！）。
表1. 2024 Q3 Incucyte®文章第一作者單位分布
從文章的分布單位來看，很多單位在一個季度內就發了多篇文章，例如澳門大學，濱州醫學院以及電子科技大學等。利用Incucyte®，研究人員可以高效地獲得實時的細胞信息，并快速地獲得可信的研究成果。足以說明Incucyte®因其簡單易用和短時間內生成多維精準數據，是發表高質量研究文章的利器！
表2. 2024 Q3的Incucyte®文章應用分布
Incucyte®應用非常廣泛，從這些文章中可以看出，除了傳統的細胞增殖活性和劃痕遷移實驗外，還有類器官、吞噬和內化等多種應用。
陳老師就選幾篇比較典型的國內文章介紹一下
最新應用
類器官制備外泌體
北大三院[1]
唾液來源的外泌體可加速傷口修復，但由于口腔環境復雜，提取較為困難。作為一種可行的替代方案，本文建立了人類小唾液腺類器官（hMSG-ORG）來產生外泌體 （MsOrg-Exo）。在體外實驗中，MsOrg-Exo 顯著增強了細胞增殖、遷移和血管生成能力。MsOrg-Exo 促進傷口部位的增殖、血管生成和生長因子的分泌。Incucyte®用來追蹤類器官的生長以及細胞的增殖情況。
圖1. 連續跟蹤單細胞生長。在第三天觀察到直徑約為 100 μm 的小球形腺泡狀類器官的形成。隨后，腺泡的面積逐漸增加，培養兩周后直徑達到 1-2 mm
為了驗證 hMSG-ORGs 是否可以在體外模擬唾液腺功能，研究使用毒蕈堿受體激動劑卡巴膽、β受體激動劑異丙腎上腺素和非膽堿能肽神經遞質VIP進行了功能性腫脹測定。Incucyte®結果顯示，在給藥后 2 小時內，hMSG-ORGs 中腺泡樣結構顯著腫脹，而用 DMSO 處理的 hMSG-ORG 未觀察到顯著變化，這表明 hMSG-ORGs 可以在體外對不同的神經遞質刺激做出反應。
圖2. Incucyte® 在 5 小時內以 2 分鐘的間隔捕獲類器官的明場圖像
將 HUVEC、HaCaT 和 HSF 細胞以 3000個細胞/孔的密度接種，然后用MsOrg-Exo處理。在接下來的 500 小時內，使用 Incucyte® 系統每小時測量一次每個孔的細胞面積。
圖3. 用 MsOrg-Exo 處理的 HUVEC、HaCaT 和 HSF 細胞的增殖測定，Incucyte® 在 36 小時內連續跟蹤細胞生長區域 （N = 3），可見MsOrg-Exo可以促進細胞的增殖。
Incucyte®可以對類器官進行層掃拍攝，最快可以幾分鐘間隔拍攝。
最多數據
化療耐藥與FTO
盛京醫院[2]
化療耐藥是神經母細胞瘤（NB）患者治療失敗的重要原因，直接影響患者的預后。本文研究了脂肪量和肥胖相關基因（FTO）在NB細胞對各種化療藥物的化療敏感性中的作用。FTO過表達抑制細胞增殖，而FTO敲低促進NB細胞增殖。FTO的下調降低了NB細胞對紫杉醇的敏感性，而FTO的上調增強了其敏感性。此外，FTO表達較低和較高的患者對各種化療藥物或小分子抑制劑的敏感性不同。這一發現可能指導醫生和患者選擇合適的化療藥物或小分子抑制劑進行治療。文中多數數據都是Incucyte®生成的！
圖4. 左圖為兩種NB細胞系的生長曲線，中圖為終點計算結果，右圖為原始圖（黃色為細胞識別）
兩個實驗組差別不大，但是Incucyte®對群體細胞增殖分析結果具有良好的重復性，可以判定微小差別實驗組之間的顯著性。
最高影響因子
巨噬細胞活化機制
首都醫科大學[3]
人組蛋白macroH2A1.2整合到核小體中不會影響它們的穩定性或折疊動力學，但它顯著阻礙了促進染色質轉錄（FACT）功能。本文發現FACT有效地降低了macroH2A1.2-核小體的穩定性，確定了macroH2A1.2 中的殘基S139A突變是調節FACT在核小體維持功能的關鍵開關。S139A突變重塑macroH2A分布并影響刺激誘導的轉錄和巨噬細胞中的細胞反應。本文闡明了macroH2A1.2和FACT在核小體水平上錯綜復雜的相互作用機制，并闡明了它們在巨噬細胞轉錄調控和免疫反應中的作用。
圖5. Incucyte®測試發現：將PE標記的磁珠和巨噬細胞混合，發現S139A突變后的巨噬細胞的吞噬能力減弱。15分鐘拍攝一次，20倍鏡，共拍攝360次。
拍攝360次，人工操作是不可能的呢！
Incucyte®長時程活細胞
成像系統應用文集
為了將Incucyte®推廣到更多活細胞實驗，我們致力于提供全面的應用解決方案。《Incucyte® 長時程活細胞成像系統應用文集》除了基礎的細胞增殖和活性監測外(如細胞凋亡/周期/毒性等)，還涵蓋了抗體內化、旁觀者效應、共培養殺傷、炎癥反應(NETosis)、細胞吞噬、劃痕實驗、細胞趨化、類器官研究、腫瘤球分析、神經突生長、 ATP 檢測、線粒體膜電位、病毒/脂質體/外泌體監測、全孔成像等多個方面。應用范圍廣，是您尋找實驗方法的有利工具。
為什么Incucyte®那么火熱呢？
培養箱內無限時間的連續觀察，最短幾分鐘間隔拍攝，減少人力，防止過多操作對細胞的傷害
6個板位，分別獨立設置檢測程序，可以兼容各種孔板和培養皿，通量高
高效簡便的模塊化軟件設置和數據分析，輸出圖片、視頻、生長曲線等多指標多參數
> 100種優化過的配套熒光試劑和耗材及詳盡的protocol
一句話：放好您的細胞，其他交給Incucyte®吧！
-參考文獻-
[1]GelMA loaded with exosomes from human minor salivary gland organoids enhances wound healing by inducing macrophage polarization | Journal of Nanobiotechnology (springer.com)
[2]Frontiers | FTO diversely influences sensitivity of neuroblastoma cells to various chemotherapeutic drugs (frontiersin.org)
[3]FACT mediates the depletion of macroH2A1.2 to expedite gene transcription: Molecular Cell
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