使用C18柱的循環制備純化案例 三萜皂苷
色譜條件:
色譜柱為C18柱(直徑20×長500mm);流動相乙腈:甲醇(3∶2);體積流量5mL/min;柱溫:室溫;檢測波長210 nm和RI檢測器;進樣量6mL。
上:紫外譜圖;下:RI譜圖
色譜分離:
將待分樣品溶于流動相乙腈:甲醇(3∶2),采用 ODS C18色譜柱分離,分別用UV 檢測器及RI檢測器檢測峰信號(見上)。樣品通過色譜柱時檢測到4 個峰信號,保留時間為50~85min。在保留時間為50 min 時啟動儀器的循環系統,不收集組分,這樣可以把前面的雜質峰除去,只保留樣品峰,從而單獨使樣品在整個系統中循環一次,相當于樣品兩次通過C18色譜柱,進行兩次分離。在保留時間為100 min 時根據峰信號開始收集各組分。
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