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實驗室常用鉆石刀處理不同種類不同硬度的樣本，對于昂貴精密的鉆石刀，大家往往會認(rèn)為它容易損壞，其實這是一種錯誤的認(rèn)識。Diatome公司的鉆石刀不僅可以使用很多年，而且也能保證你一直獲得滿意的樣本切片。重要的是，當(dāng)你*次使用Diatome鉆石刀時，下面的說明或者警告還是有必要仔細(xì)閱讀。
- 仔細(xì)檢查外包裝盒沒有損壞或打開過
- 確認(rèn)鉆石刀在藍(lán)色塑料盒內(nèi)
- 小心拿取鉆石刀，注意保護(hù)不要損傷刀刃
- 一旦取出鉆石刀，就要將其放置在一個安全的位置
注：每把Diatome鉆石刀在包裝前都經(jīng)過了檢查，它的刀刃是潔凈的。因只有經(jīng)過了我們嚴(yán)格的高標(biāo)準(zhǔn)檢查之后，它才能被運(yùn)輸，故*次使用時不需要清洗刀刃。
切片前的準(zhǔn)備工作
切片前，樣品塊需要進(jìn)行修整以確保的切片。樣品塊修整的基本形狀見下示意圖：
切記，樣品塊的修整對得到高質(zhì)量的切片非常關(guān)鍵；使用時，鉆石刀的刀鋒必須與樣品塊的上下面平行；樣品塊不要太厚，如果太厚會增加切片時的壓力。
我們工作中發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過樹脂包埋的樣品用我們提供的修整鉆石刀進(jìn)行修整可以得到的結(jié)果。對于冰凍切片、生物樣本、工業(yè)樣本的修整，我們的低溫鉆石修整刀可以得出的結(jié)果。如果用剃須刀刀片進(jìn)行修整，用新的無脂刀片進(jìn)行，在修整zui后幾刀時，換新刀片進(jìn)行。
警告：
如果使用比較舊的剃須刀片或者樣本塊太厚，有一種可能會發(fā)生：剃須刀刀刃的鋼粒子脫落在樣本上，當(dāng)你使用鉆石刀切割該樣本時，上面的鋼粒子非常容易破壞鉆石刀刃。假如初始樣本塊是使用玻璃刀制作，那么要注意僅使用潔凈的新的刀刃，避免玻璃粒子粘在樣本上。
切片
1.室溫切片
下面講述的都是影響或者決定你的切片質(zhì)量的關(guān)鍵因素，切片前請仔細(xì)閱讀。
- 樣本塊的放置：必須與鉆石刀的刀刃平行
- 樣本塊固定螺栓、刀把等都要擰緊
- 鉆石刀參數(shù)：切角和切速要按照說明書的參數(shù)設(shè)定
- 水槽液體：液體水平面要與鉆石刀刃水平，水槽內(nèi)的水要加到與刀刃接觸為止。使用牙簽將水槽的左右兩邊弄濕，但要注意不要碰到刀刃和粘接材料。
為了減少切片困難和延長鉆石刀的使用壽命，應(yīng)該熟記下面的小竅門：
- 不要加其它溶劑到水槽的蒸餾水里；它們或許溶解鉆石刀刃與水槽的粘接材料； 溶劑會降低水的表面張力；.溶劑或許破壞你的樣本材料
- 不要切超過zui大允許厚度范圍的樣本
- 樣本塊要充分包埋，不要太寬
- 避免任何硬的物品如銅網(wǎng)、鑷子等碰到鉆石刀刀刃
- 不能在鉆石刀刃上干燥切片。
2. 低溫切片
低溫切片容易發(fā)生樣本粘刀、卷曲、聚團(tuán)或者漂移等問題，引起這些問題的主要原因就是低溫腔靜電。溫度越低，現(xiàn)象越明顯。為了解決這些問題，使低溫切片和室溫切片一樣容易，Diatome公司推薦使用Static-Line" II 靜電消除器，在樣本修整和切片時都使用靜電消除器，這樣您就會獲得比使用玻璃刀好得多的切片，樣本幾乎沒有壓縮變形并且非常均勻。
目前廣泛應(yīng)用的低溫切片是Tokuyasu技術(shù)，針對這種切片技術(shù)，我們發(fā)現(xiàn)如下兩條規(guī)律很適合鉆石刀：
1. 修整樣本或者半薄切片時溫度為: - 80°C
2. 超薄切片時溫度為： -110°C to -120°C
切片后刀的清潔
1．方法一
取走切片，迅速移除不用的切片雜物，然后按照下面的步驟清潔刀刃:
1）.清空刀槽然后將其再安裝到切片機(jī)上.
2）.使用無脂剃刀將我們提供的苯乙烯棒切出一個45º斜面
3）.用清潔棒沾取100％乙醇，抖落多余的乙醇
4）.清潔棒無壓力滑過鉆石刀刃，可以重復(fù)操作
這種清潔方法是比較成熟和操作簡便的，所以使用較為普遍。但要特別注意，操作中清潔棒不要接觸到粘結(jié)區(qū)（刀刃與基座），否則會給鉆石刀帶來傷害。
備注：對于聚合不是很好的樣本塊，切片之后再進(jìn)行如上所述機(jī)械方法清潔是必要的.
2．方法二
如果你對于方法一的清潔不滿意，可以使用方法二看看效果。
切片快速移開后，開始刀的清潔工作：
ⅰ使用毛圈或睫毛移除所有切片后剩余雜物
ⅱ使用蒸餾水*沖洗鉆石刀
ⅲ使用干凈的壓縮空氣吹干鉆石刀
3．方法三
如果干燥的切片或殘余粘在刀刃上，采取如下步驟
ⅰ將鉆石刀放進(jìn)蒸餾水中
ⅱ加一到兩滴中性洗滌液到蒸餾水中
ⅲ浸泡一晚
ⅳ取出鉆石刀，再用蒸餾水清洗
ⅴzui后再按照方法一的說明進(jìn)行操作
對于低溫鉆石刀，按照如下步驟進(jìn)行清洗操作：
ⅰ從低溫腔室里取出解剖刀
ⅱ用干凈的水沖洗，晾干
ⅲ重復(fù)方法一各步驟（注意，低溫切片鉆石刀建議用50％的乙醇代替100％的乙醇）
在使用Diatome鉆石刀過程中常見的問題
1. 無法弄濕鉆石刀刃
解決辦法:用*和Diatome清潔棒處理刀刃；將水槽加滿蒸餾水，直到快溢出為止。等待幾分鐘后，再將多余的蒸餾水去除，用Diatome清潔棒反復(fù)滑過鉆石刀刃進(jìn)行清潔；
假如你懷疑是因為鉆石刀刃的粘接材料被損壞從而影響不能濕潤刀刃，那么請立即，我們會安排取回這把鉆石刀，重新粘接，再歸還給您。
2. 樣本塊表面潮濕
原因：
- 對于環(huán)氧樹脂材料，一般由靜電造成
- 對于異丁烯酸鹽（脂），這些樹脂一般易吸濕受潮（比如LR White等）
解決辦法：
對于環(huán)氧樹脂:
- 提高室內(nèi)適度
- 降低水面位置
- 用濾紙干燥樣本塊表面
- 使用靜電消除器
對于異丁烯酸鹽（脂）:
- 降低水面呈凹形
3．切片褶皺
由很多原因引起：
- 外部振動
- 切片機(jī)質(zhì)量有問題
- 相關(guān)固定螺栓沒有擰緊
- 切割壓力太大
- 切割后角太小（引發(fā)切割面和鉆石刀面之間的產(chǎn)生摩擦力
解決辦法:
- 改變切片機(jī)位置
- 檢修切片機(jī)
- 緊固相關(guān)螺栓
- 減小樣本塊寬度
- 增大切割后角1－2º
4．壓力變形
原因:
- 樣本塊太軟
- 鉆石刀角度太大
- 刀刃變鈍
- 切割后角太大或者切割速度太快
解決辦法:
- 硬化樣本塊
- 將鉆石刀從45º更換小角度的
- 將刀發(fā)回工廠由Diatome公司的專業(yè)工程師評估
- 減小切割后角1-2º和降低切割速度從1mm/秒到0.5mm/秒
5. 刀痕（豁口）
切片出現(xiàn)刀痕時，大多數(shù)的鉆石刀都需要重新磨削了。
原因：
- 你的手指或者其它硬的東西碰到了刀刃
- 修整樣本塊時了其它粒子
- 樣本本身含有的較硬的粒子
- 鉆石刀的多年使用后疲勞所致
解決辦法:
- 避免其它物品碰到刀刃
- 在制樣開始就要盡力保證樣本的純凈，從取樣到固定、包埋、修整都要小心其它粒子的污染
6. 條痕
原因:
- 刀刃不完整
- 包埋樣本時，聚合不好
- 樣本塊本身不均一
解決辦法：
- 確認(rèn)樣本已經(jīng)*充分聚合
- 更換樣本塊
- 改變切割位置
如上所述僅是一般常見的問題，在實際操作中，您或許還會遇到其它各種新問題，不要猶豫，請隨時hedebio 或者h(yuǎn)edebio.cn。
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