大鼠內皮抑制素(ES)酶聯免疫分析

試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍：                                                          96T

6ng/ml - 160ng/ml

使用目的：

本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中內皮抑制素(ES)含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠內皮抑制素(ES)水平。用純化的大鼠內皮抑制素(ES)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入內皮抑制素(ES)，再與HRP標記的內皮抑制素(ES)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內皮抑制素(ES)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠內皮抑制素(ES)濃度。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

6ml×1瓶

2

酶標試劑

6ml×1瓶

8

標準品（320ng/ml）

0.5ml×1瓶

3

酶標包被板

12孔×8條

9

標準品稀釋液

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1瓶

10

說明書

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張

6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

160ng/ml

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

80ng/ml

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

40ng/ml

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

20ng/ml

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

10ng/ml

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

操作程序總結：

計算

  以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。

注意事項

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

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小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒
小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒
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小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒
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小鼠肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒
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小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒
小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒
小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒
小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒
小鼠維生素C(VC)ELISA試劑盒
小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒
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小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒
小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒
小鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒
小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒
小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒
小鼠血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒
小鼠乙酰膽堿(ACH)ELISA試劑盒
小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒
大鼠活化素A受體抗體(ACV-RAb)ELISA試劑盒
大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒
大鼠血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒
大鼠可溶性凋亡相關因子(sFAS/Apo-1)ELISA試劑盒
大鼠Bcl-2相關X蛋白(BAX)ELISA試劑盒
大鼠甘露糖結合蛋白/甘露糖結合凝集素(MBP/MBL)ELISA試劑盒 
大鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒
大鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒 
大鼠抗紅細胞抗體(RBC)ELISA試劑盒 
大鼠CD3分子(CD3)ELISA試劑盒
大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA試劑盒
大鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒 
大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒 
大鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒 
大鼠成纖維細胞生長因子10(FGF-10)ELISA試劑盒
大鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒 
大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒
大鼠Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒 
大鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒
大鼠CD8分子(CD8)ELISA試劑盒
大鼠表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒
大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒
大鼠軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒
大鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒
大鼠抗髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒
大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 
大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒
大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒
大鼠樹突狀細胞表面特異性C型凝集素-細胞間黏附分子3結合非整合素分子(DC-SIGN/CD209)
大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒
大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒 
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大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒
大鼠骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒
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大鼠轉化生長因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒
大鼠白介素32(IL-32)ELISA試劑盒
大鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒 
大鼠白介素21(IL-21)ELISA試劑盒 
大鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒 
大鼠胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒
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大鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒
大鼠孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒 
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大鼠血管緊張素Ⅰ轉化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒
大鼠促性腺激素釋放激素受體(GnRHR)ELISA試劑盒
大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒
大鼠熱休克蛋白47(HSP47)ELISA試劑盒
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大鼠L-鼠乳酸脫氫酶(L-LDH) ELISA試劑盒 
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大鼠乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒 
大鼠糖缺失性轉鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒 
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大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試劑盒
大鼠主要堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 
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大鼠鈣調磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒 
大鼠抑制素結合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒
大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒
大鼠凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒
大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒 
大鼠堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒
大鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒
大鼠脂多糖結合蛋白(LBP)ELISA試劑盒 
大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒
大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒
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