目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>抗氧系列>> BC1390-50T/48S單寧含量檢測試劑盒 抗氧化
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/48S |
貨號 | BC1390 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
主要用途 | 測定意義:單寧是一類廣泛存在于植物體內(nèi)的多元酚化合物,又稱植物多酚。具有*特的化 |
單寧含量檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
貨號:BC1390
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體75 mL×2瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 粉劑×1瓶 | 常溫保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg單寧酸。臨用前加入1.175 mL提取液溶解為5000 nmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液,2-8℃保存兩周。
產(chǎn)品說明:
單寧又稱植物多酚,是一類廣泛存在于植物體內(nèi)的多元酚化合物。單寧可作為潛在的生物標(biāo)記物;與蛋白質(zhì)結(jié)合的能力又稱為收斂性或澀性。其收斂性是多種生理活性的基礎(chǔ),如止血、抗腫瘤、抗衰老等生理活性,也是影響產(chǎn)品口感的因素之一。
根據(jù)光譜特性,單寧在275nm下有較強(qiáng)的紫外吸收,通過利用活性炭能夠特異吸附單寧的性質(zhì)來檢測單寧含量。
技術(shù)指標(biāo):
低檢出限:0.385 nmol/mL
線性范圍:0.39-18 nmol/mL
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、30-50目篩、蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
將樣本烘干至恒重,粉碎,過30-50目篩之后,稱取約0.1g,加入2mL提取液(封口膜封口防止液體濺出),于70℃水浴,準(zhǔn)確提取30min,期間可搖晃數(shù)次。12000rpm,25℃,離心10min,取上清,用提取液定容至2mL,待測。
二、測定步驟
1. 紫外分光光度計(jì)預(yù)熱30min,波長調(diào)至275nm,提取液調(diào)零。
2. 標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋:將標(biāo)準(zhǔn)液用提取液稀釋為25、12.5、6.25、3.125、1.5625、0.78125nmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3. 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表:
序號 | 稀釋前濃度(nmol/mL) | 標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL) | 提取液體積(µL) | 稀釋后濃度(nmol/mL) |
1 | 5000 | 100 | 900 | 500 |
2 | 500 | 200 | 3800 | 25 |
3 | 25 | 2000 | 2000 | 12.5 |
4 | 12.5 | 2000 | 2000 | 6.25 |
5 | 6.25 | 2000 | 2000 | 3.125 |
6 | 3.125 | 2000 | 2000 | 1.5625 |
7 | 1.5625 | 2000 | 2000 | 0.78125 |
備注:實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需1000µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。
4. 加樣表:
試劑名稱 | 測定管 | 對照管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
試劑一 | 大約10-15mg | - | - | 大約10-15mg |
提取液 | - | - | - | 1mL |
標(biāo)準(zhǔn)溶液 | - | - | 1mL | - |
樣本 | 1mL | 1mL | - | - |
充分混勻震蕩5min,13000g 室溫離心20min。取上清液測定275nm下的吸光度,分別記為A測定管、A對照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管,計(jì)算ΔA測定=A對照管-A測定管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個(gè)測定管需設(shè)一個(gè)對照管。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測1-2次。
三、單寧含量計(jì)算
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度(y,nmol/mL)和吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)(x,ΔA標(biāo)準(zhǔn)),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA測定(x,ΔA測定)帶入公式計(jì)算樣本濃度(y,nmol/mL)。
2. 單寧含量計(jì)算:
(1)按蛋白濃度計(jì)算
單寧含量(nmol/mg prot)=y×V提取÷(V提取×Cpr) =y÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算
單寧含量(nmol/g 質(zhì)量)=y×V提取÷W=2y÷W
Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;V提?。禾崛∫后w積,2mL。
注意事項(xiàng):
1. 如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測定。注意同步修改計(jì)算公式。
2. 按蛋白濃度計(jì)算時(shí),由于提取液中含有破壞蛋白結(jié)構(gòu)的成分,故需要重新提取蛋白進(jìn)行測定。
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC1300/BC1305 銅藍(lán)蛋白(Cp)活性檢測試劑盒
BC1310/BC1315 總抗氧化能力(T-AOC)檢測試劑盒
BC1360/BC1365 尿酸(UA)含量檢測試劑盒
單寧含量檢測試劑盒 抗氧化 單寧含量檢測試劑盒 抗氧化
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