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一、服務概述
實時熒光定量PCR（Real Time PCR）技術，是指在PCR指數擴增期間通過連續監測熒光信號強弱的變化來即時測定特異性產物的量，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。熒光定量PCR的熒光檢出方法包括SYBR green（熒光染料摻入法） 和Taqman probe （探針法）兩種方法。
二、服務內容
1.從動物細胞、人或動物組織、細菌、植物、血清、土壤等樣品中提取核酸；
2.對核酸進行濃度及純度分析；
3.熒光定量PCR檢測；
（1）引物和探針的設計與合成；
（2）定量和相對定量的選擇；
（3）探針法和染料法的選擇；
（4）熒光定量PCR儀對目的基因的檢測；
（5）數據統計和分析；
4.預實驗服務：根據客戶提供的目的基因序列或NCBI序列號提供客戶引物和探針，并篩選出優化的引物和探針；
5.正式實驗服務：根據預實驗篩選的引物和探針對所用樣品進行熒光定量PCR的檢測，并對結果進行統計和分析。
三、樣品要求
細胞＞1×106個；組織＞50mg；細菌濕重＞50mg；植物＞100mg；血清＞50μl；土壤干重＞200mg。
四、收費標準
| 項目服務 | 內容 | 周期（工作日） | 收費標準 |
| 抽提樣品DNA或RNA | 細胞樣品 | 5 | 200元/樣本 |
| 組織樣品 | 5 | 200元/樣本 | |
| 引物設計與合成 | 優化引物&探針設計及合成 | 5 | 2500元/對 |
| RT反應 | mRNA反轉錄成cDNA | 5 | 200元/樣本 |
| 預實驗：熒光PCR體系優化 | 確定熒光PCR反應條件 | 5 | 200元/樣本 |
| 標準曲線制作 | 相對定量（不需要） | 15 | 免費 |
| 定量（需要） | 免費 | ||
| 熒光PCR檢測 | 基因（包括目的基因和內參基因） | 10 | 300元/樣本 |
五、客戶需提供
1.請提供新鮮材料或直接提供已純化的DNA/RNA，確保總量>5μg/樣品。如果目的基因表達量較低時，應盡量提供更高濃度的總RNA或DNA；
2.請提供已知的全長基因序列（GeneBank Accession Number、Gene ID）；
3.請提供盡可能詳細的背景資料：生物物種信息（Human、Mouse、Rat等）、DNA/RNA來源、豐度等；
4.客戶可以提供引物，沒有引物的情況下，本公司幫助設計合成。
六、索萊寶提供
1.RNA抽提和PCR擴增電泳結果的數碼拍照，定量PCR實驗結果原始文件及相關軟件；
2.提供實驗報告，包括實驗方法、步驟、所用試劑、儀器、數碼照片及相關分析數據等，如有必要可以協助客戶進行相關的數據處理和分析。
七、索萊寶優勢
1.采用480II型實時熒光定量PCR儀，提供可靠的數據；
2.嚴格的質控標準，豐富的引物設計經驗，確保實驗成功；
3.*溝通，強大的實時解決您的問題；
4.完整的實驗報告，讓您輕松分析實驗結果。
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