T4 DNA 連接酶 T4 DNA Ligase南京賽泓瑞優(yōu)質(zhì)試劑之一,*,質(zhì)量保證 。
T4 DNA 連接酶 T4 DNA Ligase相關(guān)的其他產(chǎn)品
T4 DNA 連接酶產(chǎn)品介紹
是從表達(dá)基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表后分離純化而來(lái)的。它催化相鄰DNA鏈的的5’-磷酸末端和3’羥基末端以磷酸二酯鍵結(jié)合反應(yīng)。該酶催化平滑末端或粘性末端DNA的連接,修復(fù)雙鏈DNA、RNA、DNA/RNA雜交中的單鏈中的單鏈切口。
T4 DNA 連接酶產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 粘性末端或平末羰雙鏈DNA的連接。
2. 雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接。
3. 雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù)。
4. 連接酶介導(dǎo)的RNA檢測(cè)。
5. 位點(diǎn)特異性突變。
6. 擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性。
產(chǎn)品儲(chǔ)存
-20℃保存
T4 DNA 連接酶活性定義
1個(gè)Weiss活性單位是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中,37°C、20分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量。
保存緩沖液
20mM Tris-HCL (PH7.5),1mM DTT,50Mm KCL,0.1mM EDTA,50%甘油 10×Ligation Buffer 400mM Tris-HCL,100mM MgCl2,100mM DTT,5mM ATP(PH7.8,25°C)
NEB 10,000 units M0202V
NEB 100,000 units M0202L
NEB 20,000 units M0202S
, high conc. (2,000,000 units/ml) NEB 100,000 units M0202M
, high conc. (2,000,000 units/ml) NEB 20,000 units M0202T
T4 Gene 32 Protein NEB 500 µg M0300L
T4 Gene 32 Protein NEB 100 µg M0300S
T4 PDG (T4 Endonuclease V) NEB 10,000 units M0308L
T4 PDG (T4 Endonuclease V) NEB 2,000 units M0308S
T4 Polynucleotide Kinase NEB 250 units M0201V
T4 Polynucleotide Kinase NEB 2,500 units M0201L
T4 Polynucleotide Kinase NEB 500 units M0201S
T4 Polynucleotide Kinase (3' phosphatase minus) NEB 1,000 units M0236L
T4 Polynucleotide Kinase (3' phosphatase minus) NEB 200 units M0236S
T7 Endonuclease I NEB 1,250 units M0302L
T7 Endonuclease I NEB 250 units M0302S
T7 Exonuclease NEB 5,000 units M0263L
T7 Exonuclease NEB 1,000 units M0263S
Taq DNA Ligase NEB 1,000 units M0208V
Taq DNA Ligase NEB 10,000 units M0208L
Taq DNA Ligase NEB 2,000 units M0208S
TaqI Methylase NEB 5,000 units M0219L
TaqI Methylase NEB 1,000 units M0219S
Thermostable Inorganic Pyrophosphatase NEB 1,250 units M0296L
Thermostable Inorganic Pyrophosphatase NEB 250 units M0296S
Tma Endonuclease III NEB 2,500 units M0291L
Tma Endonuclease III NEB 500 units M0291S
Topoisomerase I (E. coli) NEB 500 units M0301L
Topoisomerase I (E. coli) NEB 100 units M0301S
Tth Endonuclease IV NEB 2,500 units M0294L
Tth Endonuclease IV NEB 500 units M0294S
Tth RecA NEB 100 µg M2402S
Universal USER Cassette NEB 50 pmol N5504S
Uracil Glycosylase Inhibitor (UGI) NEB 1,000 units M0281L
Uracil Glycosylase Inhibitor (UGI) NEB 200 units M0281S
Uracil-DNA Glycosylase (UDG) NEB 500 units M0280V
Uracil-DNA Glycosylase (UDG) NEB 5,000 units M0280L
Uracil-DNA Glycosylase (UDG) NEB 1,000 units M0280S
USER Enzyme NEB 250 units M5505L
USER Enzyme NEB 50 units M5505S
β-Agarase I NEB 500 units M0392L
β-Agarase I NEB 100 units M0392S
Promega 100U M1801
Promega 500U M1804
即T4 DNA連接酶,可以催化粘端或平端雙鏈DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之間以磷酸二酯鍵結(jié)合,該催化反應(yīng)需ATP作為輔助因子。同時(shí)T4 DNA連接酶可以修補(bǔ)雙鏈DNA、雙鏈RNA或DNA/RNA雜合物上的單鏈缺刻(single-strand nicks)。
用途:常用于DNA 和載體、linker或adaptor等的連接。也可以用于缺刻修復(fù)及Ligase介導(dǎo)的RNA檢測(cè)。
來(lái)源:本由大腸桿菌表達(dá),表達(dá)基因的來(lái)源為T4嗜菌體。
活性定義:One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of lambda DNA in 30 min at 16℃ in 20 μl of the assay mixture containing 50 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 μg/ml BSA and a 5'-DNA termini concentration of 0.12 μM(300 μg/ml)。200U等于1個(gè)Weiss unit,以Weiss unit計(jì),本產(chǎn)品共1000單位。
純度:不含DNA內(nèi)切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,滿足常規(guī)連接反應(yīng)要求。
酶儲(chǔ)存溶液:20 mM Tris, pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50%(v/v)glycerol。
10X Ligation Buffer:400 mM Tris, pH 7.8, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP。
失活或抑制:65℃孵育10分鐘可以導(dǎo)致失活;NaCl或KCl濃度大于200mM時(shí)強(qiáng)烈抑制。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝
D7008-1
(1000U/μl)
200,000U
D7008-2
10X Ligation Buffer
1.5ml
-
說(shuō)明書
1份
保存條件:
-20℃保存。
注意事項(xiàng):
對(duì)于普通的轉(zhuǎn)化大腸桿菌的操作,不必對(duì)連接產(chǎn)物進(jìn)行純化,連接產(chǎn)物可以直接用于轉(zhuǎn)化。但用電轉(zhuǎn)方法轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí),通常宜先用DNA純化試劑盒或酚氯仿抽提方法等純化DNA,然后再進(jìn)行電轉(zhuǎn)。
需進(jìn)行平端連接或快速連接時(shí),*使用碧云天的快速DNA連接試劑盒(D7002/D7003)。可以進(jìn)行平端連接,但效率較低。
普通的連接反應(yīng)不必進(jìn)行凝膠電泳觀察。如果需要對(duì)于連接產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳觀察,*先在65℃孵育10分鐘使失活,以避免和DNA結(jié)合導(dǎo)致的條帶位置遷移(band shift)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
飼料、谷物 |
歡迎訂購(gòu)賽泓瑞生物公司T4 DNA 連接酶 產(chǎn)品。詳細(xì)請(qǐng)和我們、或留言。