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蛋白雙向(2-D)電泳實驗流程

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更新時間:2023-10-26 14:56:49瀏覽次數:4410次

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產地類別 國產 應用領域 醫療衛生,生物產業
[平臺項目開展范圍]慢病毒,腺病毒,RNAi類, 分子生物實驗,病理實驗,免疫學實驗,細胞實驗,動物實驗,蛋白組學實驗,芯片類實驗,并為廣大客戶朋友們提供課題設計指導、基金申請指導、SCI、 核心期刊等服務。蛋白雙向(2-D)電泳實驗流程

蛋白雙向(2-D)電泳實驗服務



實驗技術簡介:

雙向電泳(two-dimensional electrophoresis)是等電聚焦電泳和SDS -PAGE的組合,即先進行等電聚焦電泳(按照pI分離),然后再進行SDS-PAGE (按照分子大小), 經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。


實驗原理:

雙向電泳是目前為止you效、使用多的蛋白分離方法。差異蛋白質組學是在雙向電泳后用考麻斯亮藍、銀離子或熒光染料等將蛋白斑點染色,然后比較差異。本公司在各類微生物、培養細胞、動植物組織(如動物軟硬組織、體液、植物種子、葉子等)、亞細胞組分的雙向電泳分離及后續質譜鑒定中均有豐富的經驗。


蛋白質組學雙向電泳技術服務項目:

1.根據客戶需求定制蛋白質組學實驗方案

2.各種規格膠條長度的雙向電泳

3.考麻斯亮藍染色、銀離子染色; .

4.DIGE系統雙向電泳。

5.圖像分析

6.切膠質譜分析


服務說明:

1.我們的實驗只對我們制作的樣本負責,如您提供的是直接做等點聚焦的樣本,我們不敢保證蛋白的有效分離。

2.蛋白質組學實驗的總體實驗流程;


實驗流程:

1、樣本制備

2、固相預制膠條水化

3、第--向等電聚焦(IEF)

4、膠條平衡→第二向SDS-PAGE電泳

5、凝膠染色檢測

6、圖片掃描


雙向電泳服務結果提交:

1、實驗的試劑耗材、儀器設備、操作過程--份;

2、實驗結果凝膠掃描圖片;

3、電泳凝膠(可收費干膠) ;

4、剩余樣本。


說明:

1.樣品制備指可用通常程序處理的原樣,如樣品較特殊(需要去除核酸、鹽等雜質或需要濃縮),價格將視進一步處理的難度和耗材用量另行商定;

2.建議客戶提供的原樣(組織、細胞、菌體等)濕重不少于100mg如直接提供蛋白提取物,則濃度不少于4ug/ul,總量不少于5mg;

3.樣品的還原和烷基化過程一般在制備時進行;

4.圖象處理與切膠主要是手I操作成本。


客戶方需提供:

細胞,組織或蛋白。


實驗周期:

5-10天


可提供技術支持: .

1、從現有的生物有機體基因組中,經過酶切消化或PCR擴增等方法,獲得帶有目的基因的DNA  的片段。

2、在體外,將帶有目的基因的外源DNA  的片段連接到具有選擇標記的載體分子上,形成能夠自主復制的重組DNA分子。

3、將重組DNA分子轉移到適宜的受體細胞,并使其一起增殖。

4、從大量的細胞繁殖群體中,篩選出獲得了重組DNA分子的受體細胞克隆。

5、由篩選出來的受體細胞克隆,提取出已經得到擴增的目的基因,供進一步分析研究使用。

6、將分離到的目的基因克隆到表達載體上,導入受體細胞,使之在新的遺傳背景下實現功能表達,產生出人類所需要的物質。

2011年開始我們致力于在生命科學領域生物醫學實驗外包及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯系。

 

實驗代做服務:

 


蛋白雙向(2-D)電泳實驗流程

[平臺項目開展范圍]慢病毒,腺病毒,RNAi類, 分子生物實驗,病理實

蛋白雙向 電泳實驗服務

蛋白雙向 電泳實驗服務$r$n提供商:上海研謹生物/杭州研謹生物$r$

非標定量(Label-free)實驗周期及交付標準

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