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MMVECS 細胞株復蘇失敗原因分析
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產品名稱:MMVECS 細胞
中文名稱:小鼠心肌微血管內皮細胞
種屬:小鼠
來源:心肌微血管;內皮細胞
培養條件:DMEM
生長狀態:貼壁
MMVECS 細胞株復蘇失敗原因分析
大規模培養技術應用簡介
通過大規模體外培養技術培養哺乳類動物細胞是生產生物制品的有效方法。20世界60-70年代,就已創立了可用于大規模培養動物細胞的微載體培養系統和中空纖維細胞培養技術。近十數年來,由于人類對生長激素、干擾素、單克隆抗體、疫苗及白細胞介素等生物制品的需求猛增,以傳統的生物化學技術從動物組織獲取生物制品已遠遠不能滿足這一需求。隨著細胞培養的原理與方法日臻完善,動物細胞大規模培養技術趨于成熟。
所謂動物細胞大規模培養技術(large-scale culture technology)是指在人工條件下(設定ph、溫度、溶氧等),在細胞生物反應器(bioreactor)中高密度大量培養動物細胞用于生產生物制品的技術。目前可大規模培養的動物細胞有雞胚、豬腎、猴腎、地鼠腎等多種原代細胞及人二倍體細胞、cho(中華倉鼠卵巢)細胞、BHK-21(倉鼠腎細胞)、Vero細胞(非洲綠猴腎傳代細胞,是貼壁依賴的成纖維細胞)等,并已成功生產了包括狂犬病疫苗、口蹄疫疫苗、甲型肝炎疫苗、乙型肝炎疫苗、紅細胞生成素、單克隆抗體等產品。
在過去幾十年來,該技術經有了很大發展,從使用轉瓶(roller bottle) 、CellCube等貼壁細胞培養,發展為生物反應器(Bioreactor)進行大規模細胞培養。*代細胞培養技術核心問題是難以產業化或者說是規模化生產:一是在工藝生產時不能大規模制備產品;二是非批量生產容易導致產品質量的不均一性;三是難以對同批生產進行生產和質量控制。
隨著生物技術的發展,迫切需要大規模的細胞培養,特別是培養表達特異性蛋白的哺乳動物細胞,以便獲得大量有用的細胞表達產物。采用玻璃瓶靜置或旋轉瓶的培養方法,已不能滿足所需細胞數量及其分泌產物。因而必須為工業化生產開創一種新的技術方法。自70年代以來,細胞培養用生物反應器有很大的發展,種類越來越多,規模越來越大,較常見的細胞培養生物反應器有空氣提升反應器,中空纖維管反應器,無泡攪拌反應器及籃式生物反應器等。八十年代以來,人們逐漸開始以生物反應器培養代替鼠腹水的方法獲得單克隆抗體。
動物細胞是一種無細胞壁的真核細胞,生長緩慢,對培養環境十分敏感。采用傳統的生物化工技術進行動物細胞大量培養,除了要滿足培養過程必需的營養要求外,有必要建立合理的控制模型,進行pH和溶氧(DO)的*控制。細胞生物反應器可通過微機有序地定量地控制加入動物細胞培養罐內的空氣、氧氣、氮氣和二氧化碳四種氣體的流量,使其保持*的比例來控制細胞培養液中的pH值和溶氧水平,使系統始終處于*狀態,以滿足動物細胞的生長對pH值和溶解氧的需要。如為提高或達到一定的溶氧水平可改變通入培養罐內氣體中氧氣和氮氣的比例來實現控制DO值的目的。采用二氧化碳/碳酸氫鈉(CO2/NaHCO3)緩沖液系統來控制培養液的pH值是一種較好的方法。
MMVECS 細胞株復蘇失敗原因分析
Farage 人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞 人 彌漫大B淋巴瘤;淋巴結轉移;女性 1640 懸浮
OCI-LY3 人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞 人 彌漫大B淋巴瘤;男性 1640 懸浮
3D4/21 豬肺泡巨噬細胞 豬 肺泡巨噬細胞;SV40轉化;Landrace DMEM 貼壁
HEEpiC 人食管上皮細胞 人 食管;上皮細胞 1640 貼壁
CP70 人卵巢癌細胞 人 卵巢癌;女性 1640 貼壁
KYSE450 人食管癌細胞 人 食管鱗癌;男性 EMEM 貼壁
BNL1MEA.7R.1 小鼠肝上皮細胞 小鼠 肝;上皮細胞 1640 貼壁
HCC-78 人肺腺癌細胞 人 肺腺癌;男性 EMEM 貼壁
SHEE 永生化食管上皮細胞 人 食管;上皮細胞 1640 貼壁
ECV304 人臍靜脈內皮(膀胱癌)細胞 人 膀胱癌 1640 貼壁
HM 人小神經膠質細胞 人 小神經膠質細胞 DMEM 貼壁
CTV-1 人急性T淋巴細胞白血病細胞 人 急性T淋巴細胞白血病;男性 1640 懸浮
GDM-1 人急性粒細胞白血病細胞 人 急性粒細胞白血病;女性 IMDM 懸浮
DOhh2 人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞 人 人彌漫大B淋巴瘤;男性 1640 懸浮
HBE 人支氣管上皮細胞 人 支氣管;上皮細胞 DMEM 貼壁
LADMAC 小鼠骨髓淋巴細胞 人 骨髓淋巴細胞;C3H DMEM 懸浮
EOC20 小鼠小膠質細胞 小鼠 小膠質細胞; C3H/HeJ DMEM 貼壁
A2058 人黑色素瘤細胞 人 黑色素瘤;淋巴結轉移;男性 DMEM 貼壁
BMSCs 小鼠骨髓間充質干細胞 小鼠 骨髓間充質干細胞 DMDM 貼壁
HuCCT1 人肝內膽管癌細胞 人 肝內膽管癌;男性 DMEM 貼壁
huh28 人膽管癌細胞 人 肝內膽管癌 1640 貼壁
TE354T 人皮膚基底細胞癌細胞 人 皮膚基底細胞癌;女性 DMEM 貼壁
NCI-H820 人乳頭狀肺腺癌細胞 人 乳頭狀肺腺癌;淋巴結轉移;男性 1640 貼壁
CAOV-3 人卵巢腺癌細胞 人 卵巢癌;女性 DMEM 貼壁
HSMC 人骨骼肌細胞 人 骨骼肌 DMEM 貼壁
VSMC 大鼠胸主動脈平滑肌細胞 大鼠 胸主動脈平滑肌 DMEM 貼壁
SNU398 人肝癌細胞 人 肝癌;男性 DMEM 貼壁+懸浮
CCC-HHM-2 人胚心肌組織來源細胞 人 心肌 DMEM 貼壁
HCFB 人心肌成纖維細胞 人 心肌;成纖維細胞 DMEM 貼壁
CCC-HEH-2 人胚心肌組織來源細胞 人 心肌 DMEM 貼壁
MT2 人T淋巴細胞白血病細胞 人 T淋巴細胞白血病 1640 懸浮
HMSC 人骨髓間充質干細胞 人 骨髓間充質干細胞 McCoy’s 貼壁
HL-1 小鼠心房肌細胞 小鼠 心肌;SV40轉化 DMEM 貼壁
TU212 人喉癌細胞 人 頭頸鱗癌 1640 貼壁
SNU-C1 人結腸癌細胞 人 結腸癌;男性 1640 貼壁
HSF 人皮膚成纖維細胞 人 皮膚;成纖維細胞 DMEM 貼壁
M-20 人胚胎皮膚細胞 人 黑色素瘤 DMEM 貼壁
HNEpC 人鼻粘膜上皮細胞 人 鼻粘膜;上皮細胞 1640 貼壁
HFTF 人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞 人 胚胎;眼;成纖維細胞 DMEM 貼壁
MSC 豬骨髓間質干細胞 豬 骨髓間質干細胞 1640 貼壁
SJSA-1 人骨肉瘤細胞 人 骨肉瘤;男性 DMEM 貼壁
MC38 小鼠結腸癌細胞 小鼠 結腸癌;雌性;C57BL/6 1640 貼壁
MeT- 人膜膜間皮細胞 人 膜膜間皮細胞;SV40轉化;男性 DMEM 貼壁
Mousepodocyte 小鼠腎足細胞 小鼠 腎;足細胞 DMEM 貼壁
Ratpodocyte 大鼠腎足細胞 大鼠 腎;足細胞 DMEM 貼壁
兔軟骨細胞 兔 軟骨 DMEM 貼壁
HCM 人心肌細胞 人 心肌 DMEM 貼壁
SU-DHL-6 人彌漫大B淋巴瘤細胞 人 彌漫大B淋巴瘤;腹腔轉移;男性 1640 懸浮
RC-K8 人彌漫大B淋巴瘤細胞 人 彌漫大B淋巴瘤;腹腔轉移;男性 1640 懸浮
NCI-H929 人骨髓瘤細胞 人 骨髓瘤;女性 IMDM 懸浮
RT-112 人膀胱癌細胞 人 膀胱癌;女性 1640 貼壁
HCCLM3 人高轉移肝癌細胞 人 肝癌;男性 DMEM 貼壁
SACC-83 涎腺腺樣囊性癌細胞 人 涎腺腺樣囊性癌 1640 貼壁
SACC-LM 涎腺腺樣囊性癌細胞 人 涎腺腺樣囊性癌 1640 貼壁
Malme-3M 人惡性黑色素瘤細胞 人 黑色素瘤;肺轉移;男性 DMEM 貼壁
HCV-29 人膀胱上皮細胞 人 膀胱癌;男性 1640 貼壁
McA-RH7777 大鼠肝癌細胞 大鼠 肝癌;雌性;Buffalo DMEM 貼壁
HOPC 人少突膠質前體細胞 人 少突膠質前體細胞 1640 貼壁
SNU-5 人胃癌細胞 人 胃癌;女性 1640 懸浮
MiaPaCa-2 人胰腺癌細胞 人 胰腺導管癌;男性 1640 貼壁
BIU-87 人膀胱癌細胞 人 膀胱癌;男性 1640 貼壁
KM12 人結腸癌細胞 人 結腸癌 IMDM 貼壁
NP69 人鼻咽上皮細胞 人 鼻咽;上皮細胞;SV40轉化 1640 貼壁
NCI-H295R 人腎上腺皮質腺癌細胞 人 腎上腺皮質癌;女性 DMEM 貼壁
Karpas-422 人類B細胞非霍奇金淋巴瘤細胞 人 彌漫大B淋巴瘤;女性 1640 懸浮
HMVEC 人肺微血管內皮細胞 人 肺;微血管;內皮細胞 DMEM 貼壁
HPASMC 人肺動脈平滑肌細胞 人 肺動脈平滑肌細胞 DMEM 貼壁
HK-2 人腎小管上皮細胞 人 腎小管;上皮細胞;HPV16轉化;男性 DMEM/F12 貼壁
ECA109 人食管癌細胞 人 食管鱗癌;女性 1640 貼壁
NHDF 正常人皮膚成纖維細胞 人 皮膚;成纖維細胞 DMEM 貼壁
LX-2 人肝星形細胞 人 肝;星形細胞;男性 1640 貼壁
MM.1S 人多發性骨髓瘤細胞 人 骨髓瘤;女性 IMDM 懸浮
KYSE270 人食管鱗癌細胞 人 食管鱗癌;男性 1640 貼壁
TE-10 人食管癌細胞 人 食管鱗癌;男性 DMEM 貼壁
Nb2 大鼠淋巴瘤細胞 大鼠 惡性淋巴瘤;雄性;Nb 1640 懸浮
C3H/10T1/2 小鼠間充質干細胞 小鼠 間充質干細胞;自發永生;C3H DMDM 貼壁
MSCs 小鼠臍帶間充質干細胞 小鼠 臍帶;間充質干細胞 DMDM 貼壁
HSC 人雪旺細胞 人 雪旺細胞 DMEM 貼壁
HFLS 人滑膜成纖維細胞 人 滑膜;成纖維細胞 DMEM 貼壁
S180 小鼠肉瘤瘤株 小鼠 小鼠肉瘤 1640 懸浮現在,由于動物細胞培養技術在規模和可靠性方面都不斷發展,且從中得到的蛋白質也被證明是安全有效的,因此人們對動物細胞培養的態度已經發生了改變。許多人用和獸用的重要蛋白質藥物和疫苗,尤其是那些相對較大、較復雜或糖基化(glycosylated)的蛋白質來說,動物細胞培養是的生產方式。60年代初,英國AVRI研究所在貼壁細胞系BHK21中將口蹄疫病毒培養成功后,從zui初的200ml和800ml玻璃容器開始,很快就放大到30L和100L不銹鋼罐的培養規模。使用的是基于Eagle's配方的培養基,補充5%成年牛血清和蛋白胨。1967年以后,Wellcome(現為Cooper動物保健)集團分布于歐洲、非洲和南美洲8個國家的生產廠商,應用此項技術工業規模化生產口蹄疫疫苗和獸用狂犬疫苗,已掌握了5000L的細胞罐大規模培養技術。
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