13
一、雙抗體夾心法
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。
3. 加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
二、間接法
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃；
2.次日洗滌3次；
3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌；
4.（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml；
5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；
6.zui后一遍用DDW洗滌。
其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
大鼠15-脂加氧酶(15-LO)ELISA試劑盒標本收集:
血清：全血標本于室溫放置2小時或4℃后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應為一次性的無熱原，無內毒素試管。血漿：抗凝劑推薦使用EDTA，標本采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測。避免使用溶血，高血脂標本。其它生物標本：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測標本應清澈透明，懸浮物應離心去除。標本收集后若不及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃/-80℃電冰箱內，避免反復凍融，6個月內進行檢測,4℃保存的應在1周內進行檢測。 如果樣本中檢測物濃度高于標準品zui高值，請根據實際情況，做適當倍數稀釋(建議先做預實驗，以確定稀釋倍數)。
酶標儀(450nm波長濾光片)高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL,200-1000μL37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水。
大鼠15-脂加氧酶(15-LO)ELISA試劑盒 其他試劑盒：
大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA 試劑盒
大鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA 試劑盒
大鼠髓系細胞觸發受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒
大鼠基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒
人EB病毒衣殼抗原IgA(EBV-VCA-IgA)ELISA試劑盒（定性）
人晚期糖基化終末產物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒
人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒
人胱天蛋白酶9(Casp-9)Elisa試劑盒（細胞上清液）
人EB病毒早期抗原(EA)IgA ELISA試劑盒（定性）
山羊傳染性胸膜肺炎病抗體Elisa試劑盒（定性）
人降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒
大鼠前列腺素Ｅ２（PGE2）ELISA試劑盒
小鼠大內皮素(BigET)ELISA試劑盒
豬口蹄疫抗體ELISA 試劑盒（定性）
小鼠IL-4 Elisa試劑盒
小鼠IFN-r Elisa試劑盒
禽流感抗體ELISA試劑盒（定性）
黃曲霉毒素B1Elisa試劑盒
豬藍耳病抗體ELISA試劑盒（定性）
豬瘟抗體ELISA試劑盒（定性）
禽流感抗體ELISA試劑盒（定性）
人內皮素-1（ET-1）ELISA試劑盒
人中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白NAGL ELISA試劑盒(血清）
人中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白NAGL ELISA試劑盒(尿液）
人EB病毒衣殼抗原IgA(EBV-VCA-IgA)ELISA試劑盒（定性）
人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒（尿液）
人EB病毒早期抗原(EA)IgA ELISA試劑盒（定性）
小鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)Elisa試劑盒
小鼠免疫球蛋白G1(IgG1)Elisa試劑盒
小鼠免疫球蛋白G2a(IgG2a)Elisa試劑盒
人尿白細胞介素-18（IL-18）Elisa試劑盒（尿液）
山羊傳染性胸膜肺炎抗體Elisa試劑盒(定性）
人成纖維細胞生長因子4(FGF4)ELISA試劑盒
人腎損傷因子-1(KIM-1)Elisa試劑盒（尿液）
大鼠抗II型膠原蛋白抗體Elisa試劑盒
