L929細胞,小鼠成纖維細胞株
公司所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
細胞狀態不好解決方法:培養基一次不要配太多,根據用量決定。
細胞外源微生物的污染:細胞不宜長期體外培養,因為外源微生物污染的幾率大大提高。易發現和難發現的,影響細胞狀態。
建議:實驗前凍存一批細胞,隔幾個月重新復蘇。既保證實驗所用細胞代數*,又將外源污染的后果降到zui低。
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相關培養液原料()
1640培養基(GIBCO,貨號11875093) +10%進口胎牛血清(GIBCO,貨號10099141)+2mM L-G(L-谷氨酰胺)+1mM Sodium pyruvate+10mM HEPES(gibco.。貨號。15630-080)
DMEM高糖培養基(GIBCO,貨號11995065)+10%進口胎牛血清(GIBCO,貨號10099141)+4mM L-G(L-谷氨酸胺)+1mM (丙酮酸鈉1,HEPES(gibco.。貨號。15630-080)
E,MEM培養基(GIBCO,貨號11095080)+10%進口胎牛血清(GIBCO,貨號10099141)+NEAA(非必需氨基酸)+2mM L-G(L-谷氨酸胺)+1mM (丙酮酸鈉)
F12K培養基 (GIBCO,貨號11765054)+10%進口胎牛血清(GIBCO,貨號10099141)+2mM L-G(L-谷氨酸胺)
McCoy's 5a培養基(GIBCO,貨號16600082)+10%進口胎牛血清(GIBCO,貨號10099141)+1.5mM L-G(L-谷氨酸胺)
L 15培養基(Hyclone,貨號SH30525.01)+10%進口胎牛血清(GIBCO,貨號10099141)+1.5mM L-G(L-谷氨酸胺)
DMEM/F12培養基(GIBCO,貨號11330032)+10%進口胎牛血清(GIBCO,貨號10099141)+1.5mM L-G(L-谷氨酸胺)
IMDM培養基(GIBCO,貨號C12440500BT)+10%進口胎牛血清(GIBCO,貨號10099141)+1.5mM L-G(L-谷氨酸胺)
L929細胞,小鼠成纖維細胞株 步驟:
(一)凍存
1、消化細胞(同實驗二),將細胞懸液收集至離心管中。
2、1000rpm離心10分鐘,棄上清液。
3、沉淀加含保護液的培養,計數,調整至5×106/ml左右。
4、將懸液分至凍存管中,每管1 ml。
5、將凍存管口封嚴。如用安瓿瓶則火焰封口,封口一定要嚴,否則復蘇時易出現爆裂。
6、貼上標簽,寫明細胞種類,凍存日期。凍存管外拴一金屬重物和一細繩。
7、按下列順序降溫:室溫→4℃(20分鐘〕→冰箱冷凍室(30分鐘)→低溫冰箱(-30℃ 1小時)→氣態氮(30分鐘)→液氮。
注意:操作時應小心,以免液氮凍傷。液氮定期檢查,隨時補充,不能揮發干凈,一般30立升的液氮能用1~1.5月。
(二)復蘇
1、準備一個茶缸或1000ml的燒壞,內裝2/3杯37℃的溫水。
2、從液氮中取出凍存管、迅速置于溫水中并不斷攪動。使凍存管中的凍存物在1分鐘之內融化。 3、打開凍存管,將細胞懸液吸到離心管中。 4、1000rpm離心10分鐘,棄去上清液。
5、沉淀加10ml培養液,吹打均勻,再離心10分鐘,棄上清液。
6、加適當培養基后將細胞轉移至培養瓶中,37℃培養,第二天觀察生長情況。
L929細胞,小鼠成纖維細胞株 相關主要產品:
鵪鶉纖維肉瘤細胞株QT6
小鼠骨髓瘤B淋巴細胞株SP2/MIL-6
小鼠胰腺癌細胞株LTPA
小鼠逆轉錄病毒包裝株PT-67
小鼠淋巴瘤細胞株L5178YTK+/-clone3.7.2C
小鼠乳腺癌高轉移細胞株MA-891
小鼠胃癌細胞株MFC
鼠肝癌細胞株MM45T.Li
小鼠肝癌細胞株Hepa1-6
小鼠胸腺瘤細胞株EL4
小鼠膠質瘤細胞株9L
小鼠膠質瘤細胞株RAW264.7
小鼠肝癌細胞株hepA1-6
小鼠垂體瘤細胞株AtT20
小鼠乳腺癌細胞株C127
大鼠神經膠質瘤細胞株C6-121
大鼠神經膠質瘤細胞株C6-1752
大鼠神經膠質瘤細胞株C6-64
大鼠神經膠質瘤細胞株C6-70
大鼠神經膠質瘤細胞株C6-D2B
小鼠肺癌Lewis瘤株
小鼠肺腺癌細胞株LA795
小鼠胰腺腺泡細細胞株MPC-83
小鼠胰腺腺泡細胞株MPC-83瘤株
小鼠β胰島素瘤細胞株RIN-m5F
小鼠乳腺癌細胞株MA891
小鼠自發高乳腺癌細胞株TA2
小鼠宮頸癌細胞株U14
小鼠神經膠質瘤細胞株G422
小鼠腹水瘤S180瘤株
小鼠白血病細胞株C3
小鼠淋巴瘤細胞株YAC-1
小鼠肺上皮細胞株TC-1
大鼠肉瘤細胞株WistarW256
小鼠巨噬細胞株Ana-1
小鼠小膠質瘤細胞株Bv-2
大鼠胰島素瘤細胞株INS-1
大鼠肺泡巨噬細胞株NR8383
小鼠單核巨噬細胞株J774A.1
大鼠胰腺癌細胞株DSL-6A/C1
L929細胞,小鼠成纖維細胞株 試劑和器材
器材:液氮罐、凍存管(塑料螺口凍存管或安瓿瓶)、離心管、吸管、離心機等 試劑:0.25%胰酶、培養基、含保護劑的培養基(即凍存液) 凍存液配制: 培養基加入甘油或DSMO,使其終濃度達5—20%。保護劑的種類和用量視不同細胞而不同。配好后4℃下保存。