H3255細胞價格NCI-H3255人肺癌細胞株 慧穎庫存現(xiàn)貨 全國各地均可銷售 采用誠信順豐或聯(lián)邦快遞運送,確保全國各地隔日到達客戶手中
【中文名稱】人肺癌細胞株
【英文名稱】NCI-H3255或H3255
【來源】美國ATCC
【代數(shù)】3-5代
【細胞檢測】細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
【細胞凍存】液氮凍存(基礎培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS
【細胞運輸】干冰運輸(1 Vial)或活細胞運輸(T-25 flasks)
H3255細胞價格NCI-H3255人肺癌細胞株 生物體、生長特性、疾病、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、系、組織、凍存條件等細胞說明書資料,請找細胞老師 王 !
注意,新復蘇的細胞不要經(jīng)常去看去動。
換液的話,只要把培養(yǎng)基吸出,再加入新的培養(yǎng)基就可以了
如果復蘇的細胞長得很不均勻,可以胰酶消化下來再混勻后在重新加進去(像正常細胞一樣做)
復蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,對細胞造成損害。
收到細胞株包裹時, 請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
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冷凍細胞解凍程序:
依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它之成份和比例, 制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類, 若因實驗需要, 必須有所不同時, 務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成, 確定細胞適應后, 方進行所需之實驗。
FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據(jù)細胞株資料單之血清種類培養(yǎng)之。
將培養(yǎng)基置于 37 °C水槽中回溫,回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之, 移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管, 立即放入37 °C 水槽中快速解凍, 水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿, 否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化后, 以70 % ethanol 擦拭冷凍管外部, 移入無菌操作臺內(nèi)。
依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)取 10 ml培養(yǎng)基加至 T25或 T75 flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25 或T75 flask 內(nèi)之培養(yǎng)基, 混 合均勻,放入37 °C,5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
對絕大多數(shù)細胞而言,1 % 以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。唯對極少數(shù)因對DMSO 敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO 者, 則可將解凍后之細胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養(yǎng)基中,離心300 xg (約1000 rpm),5 分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后, 轉移至培養(yǎng)瓶中, 再放入37 °C, 5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。收到T25 flask 細胞時, 處理方式為︰
1. 于寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask 均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask 外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題, 不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。
2. 將原封之T25 flask 靜置于37 °C, 5 % CO2 培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37 °C, 并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基,(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml 培養(yǎng)基于flask 內(nèi),依 一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中或細胞已長滿盤, 則將細胞做傳代培養(yǎng)。
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