3t3-l1 3T3-L1細胞株 中文名稱:小鼠前脂肪細胞,慧穎細胞庫熱賣細胞株之一,全國各地均可發貨,全國統一*格!
3t3-l1 3T3-L1細胞株 傳代:
吸棄原培養液
PBS洗一兩次
加入400ul0.125%胰酶(原代加0.05% EDTA)消化
轉動培養盤,保證整個盤面都被trypsin液潤過
吸棄trypsin后37度消化3min-->以*培液(DMEM+10% FCS+1/1000Biotin+1/1000泛酸鈣-->吸打(槍的吸力調至zui小),1:10接種,前后左右搖晃培養盤,細胞均勻后放入培養箱繼續培養(10%CO2 ,37度)
3t3-l1 3T3-L1細胞株 冷凍管解凍
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
3t3-l1 3T3-L1細胞株 培養經常出現的問題
細胞出現脫落現象,加入誘導液后,操作一定要輕,尤其是加培養基,從培養板側壁流下
誘導分化初期培養基很容易變黃,這是正常現象,若擔心過低的PH值過低損傷細胞,可以用點HEPES,或直接多加些培養基
染上的 也不知道是不是脂滴,而且很難看出細胞輪廓,這很可能是沒有分化成功,與用不用染細胞核無關。不染核,單用OIL RED就可顯著看到細胞輪廓和脂滴。分化成熟后的脂肪細胞,細胞核會被脂滴“擠”到靠近細胞膜的邊緣處。
光鏡下即可明顯區分出分化和未分化的細胞。
3t3-l1 3T3-L1細胞株 來源:慧穎細胞庫
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