庫存現(xiàn)貨,細(xì)胞飽滿,有光澤,狀態(tài)良好,復(fù)蘇周期短,售后跟蹤及時(shí)到位,傳代細(xì)胞,凍存細(xì)胞形式寄出293XL-hTLR9細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞,盡在慧穎細(xì)胞庫
產(chǎn)品名稱:293XL-hTLR9細(xì)胞
中文名稱:293XL-hTLR9細(xì)胞為穩(wěn)定表達(dá)人TLR9基因的人胚腎細(xì)胞,來源于人胚腎
細(xì)胞形態(tài):上皮樣
生長狀態(tài):貼壁生長
培養(yǎng)基:DMEM 高糖90%, Fetal Bovine Serum 10%,Blasticidin 10μg/ml
培養(yǎng)條件:37℃ 5% CO2
消化條件:不可以使用胰酶進(jìn)行消化。去培養(yǎng)基,加入2ml新鮮培養(yǎng)基后,反復(fù)吹打,使細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞,重新接種。
傳化比例:1:5-1:10
換液時(shí)間:2-3天換液一次
凍存液比例:85%培養(yǎng)基,10%FBS, 5% (v/v) DMSO
凍存密度:3-5 ×10^6/管,液氮保存
293XL-hTLR9細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞操作常見問題1:
培養(yǎng)液pH對(duì)細(xì)胞生長的影響有哪些?
由于大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4,偏離此范圍對(duì)細(xì)胞將產(chǎn)生不良的影響。各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不*相同,原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受差,無限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。
但總體來說,細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些,偏酸環(huán)境中更利于細(xì)胞生長。因此,我們?cè)谂渲婆囵B(yǎng)用液時(shí),可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。培養(yǎng)基在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時(shí),溶液的pH還會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右。
293XL-hTLR9細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞操作常見問題2:
細(xì)胞傳代消化時(shí)所用胰酶濃度越高越好嗎?
不見得!因?yàn)橐鹊鞍酌溉芤旱南芰κ呛腿芤旱膒H、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關(guān)。通常情況下,pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力zui強(qiáng)。另外,鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。
培養(yǎng)細(xì)胞每次進(jìn)行傳代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反復(fù)沖洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶,以便于將含血清的培養(yǎng)基沖洗干凈,這樣就能大大提高消化液的消化能力。
細(xì)胞中心通常使用的消化液濃度為:
(1)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;
(2)0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA。
(3)0.25% 胰蛋白酶
溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。
多數(shù)細(xì)胞傳代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA這種消化液。
293XL-hTLR9細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞操作常見問題3:
培養(yǎng)細(xì)胞狀態(tài)欠佳原因有哪些:
1、 培養(yǎng)基的新鮮程度:一般加入血清后的*培養(yǎng)基,2周內(nèi)用完。否則血清有效成分失活,影響細(xì)胞培養(yǎng)。
建議:*培養(yǎng)基一次不要配太多,200ml以下。或根據(jù)用量決定。
2、 細(xì)胞外源微生物的污染:細(xì)胞不宜長期體外培養(yǎng),因?yàn)橥庠次⑸镂廴镜膸茁蚀蟠筇岣摺R装l(fā)現(xiàn)和難發(fā)現(xiàn)的。影響細(xì)胞狀態(tài)。
建議:實(shí)驗(yàn)前凍存一批細(xì)胞,隔幾個(gè)月重新復(fù)蘇。即保證實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞代數(shù)*,又將外源污染的后果降到zui低。
3、 排除其他原因:如更換培養(yǎng)條件(血清、培養(yǎng)基等);使用器皿的潔凈程度;
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