R2C細胞,大鼠睪丸間質細胞瘤,R2C細胞價格 簡介:全國統一價格,全國各地均可發貨,遠到香港、澳門、福建、新疆、內蒙古等地。
產品名稱:R2C
中文名稱:大鼠睪丸間質細胞瘤
庫存狀態:現貨
細胞規格:株
質控標準:無支原體、無污染、符合標準
運輸方式:新鮮運輸和凍存管運輸
貨期:新鮮運輸需要1-2周,凍存管運輸的需要2-3天
R2C細胞,大鼠睪丸間質細胞瘤,R2C細胞價格,質粒的相關知識:
一.如何閱讀質粒圖譜
*步:首先看 Ori 的位置,了解質粒的類型(原核/真核/穿梭質粒)。
第二步:再看篩選標記,如抗性,決定使用什么篩選標記。
--Ampr 水解β-內酰胺環,解除氨芐的毒性;
--tetr 可以阻止四環素進入細胞;
--camr 生成氯霉素羥乙酰基衍生物,使之失去毒性;
--neor(kanr)氨基糖苷磷酸轉移酶 使G418(長那霉素衍生物)失活;
--hygr 使潮霉素β失活。
第三步:看多克隆位點(MCS)。它具有多個限制酶的單一切點,便于外源基因的插入。如果在這些位點外有外源基因的插入,會導致某種標志基因的失活,從而便于篩選。MCS決定了能不能放置目的基因以及如何放置目的基因。
第四步:再看外源DNA插入片段大小。質粒一般只能容納小于10Kb的外源DNA片段。一般來說,外源DNA片段越長,越難插入,越不穩定,轉化效率越低。
第五步:是否含有表達系統元件,即啟動子-核糖體結合位點-克隆位點-轉錄終止信號,這是用來區別克隆載體與表達載體。在克隆載體中加入一些與表達調控有關的元件即成為表達載體。選用哪種載體,要以實驗目的為依據。
二.如何選擇載體
把目的基因通過基因工程手段送到生物細胞(受體細胞),需要運載工具(交通工具)攜帶外源基因進入受體細胞,這種運載工具就叫做載體(vector)。基因工程所用的vector實際上是用來攜帶目的基因片段進入受體細胞的 DNA。
選擇載體主要依據構建的目的,同時要考慮載體中應有合適的限制酶切位點。如果構建的目的是要表達一個特定的基因,則要選擇合適的表達載體。
載體選擇主要考慮下述3點:
1. 構建DNA重組體的目的:克隆載體/表達載體。
2. 載體的類型:
克隆載體的克隆能力:根據克隆片段大小(大選大,小選小)。如<10kb選質粒。
表達載體:根據受體細胞類型:原核/真核/穿梭,E.coli/哺乳類細胞表達載體。
原核表達載體要選擇合適的啟動子及相應的受體菌;表達真核蛋白時需注意閱讀框錯位問題;表達天然蛋白和融合蛋白所需載體亦有區別。
3. 選用質粒做載體的4點要求:
(1)選分子量小的質粒,即小載體(1~1.5 kb):不易損壞,在細菌里面拷貝數也多(也有大載體);
(2)一般使用松弛型質粒在細菌里擴增不受約束,一般10個以上的拷貝,而嚴謹型質粒<10個。
(3)必需具備一個以上的酶切位點,有選擇的余地;
(4)必需有易檢測的標記,多是抗生素的抗性基因。
無論選用哪種載體,首先都要獲得載體分子,然后采用適當的限制酶將載體DNA進行切割,獲得載體片段,以便于與目的基因片段進行連接。
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,血清介紹:
產品名稱 貨號 來源 規格 市場價格 備注
胎牛血清FBS S-FBS-SA-011 SOUTH AMERICA 100ML 1100 較貴細胞,原代、腫瘤細胞均可
胎牛血清FBS S-FBS-SA-015 SOUTH AMERICA 500ML 2500 較貴細胞,原代、腫瘤細胞均可胎牛血清FBS S-FBS-US-015 USA 500ML 4800 胚胎干細胞,神經類、昆蟲、哺乳細胞等
超低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS S-FBS-SA-055 SOUTH AMERICA 500ML 5200
透析胎牛血清Dialyzed FBS S-FBS-US-065 USA 500ML 5800
活性炭/葡聚糖處理胎牛血清Charcoal Stripped FBS S-FBS-AU-045 AUSTRALIA 500ML 5800
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