PC-9細(xì)胞|人肺癌細(xì)胞|STR入庫
產(chǎn)品名稱:PC-9細(xì)胞
中文名稱:人肺癌細(xì)胞
是否STR:是
供應(yīng)公司:慧穎生物
復(fù)蘇周期:1-2周
您是否在關(guān)心各種細(xì)胞系特異性鑒定方法,是否被細(xì)菌,病毒,支原體污染,購買慧穎生物細(xì)胞株細(xì)胞系值得放心,大部分細(xì)胞經(jīng)過STR鑒定,支原體,細(xì)菌,病毒檢測后入庫。!
分離培養(yǎng)法
分離培養(yǎng)法是支原體檢測的金標(biāo)方法,其檢測精確度zui高。這種方法是從可疑的細(xì)胞培養(yǎng)體系中取樣,并接種到zui適宜支原體生長的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體,它們就會在這種瓊脂平板上*生長,zui終形成明顯可見的特征性菌落。分離培養(yǎng)法基本不會出現(xiàn)假陰性結(jié)果,因此被譽(yù)為支原體檢測金標(biāo)準(zhǔn)。不過分離培養(yǎng)法也存在兩個弊端,一是檢測時間太長,支原體要長出明顯克隆至少需要4周時間。二是盡管可以檢測絕大多數(shù)支原體種類,分離培養(yǎng)法也有力所不及的時候,例如支原體M. hyorhinis。
DNA檢測
DNA檢測需要將可疑樣品與指示細(xì)胞共同培養(yǎng),因此一般需要幾天時間。DNA檢測所用的指示細(xì)胞通常是細(xì)胞質(zhì)區(qū)域較大的Vero細(xì)胞,如果原樣本中含有支原體,那么當(dāng)細(xì)胞DNA被熒光染料(如Hoechst染料)染色時,就可以在指示細(xì)胞的核周圍觀察到熒光斑點(diǎn)或熒光顆粒。分離培養(yǎng)法用來檢測支原體M. hyorhinis菌株并不可靠,而DNA法可以準(zhǔn)確的將其檢測出來。
PCR法
PCR法也可以檢測M. hyorhinis菌株,PCR法檢測支原體只需幾個小時,是zui快但也是zui不靈敏的支原體檢測方法。該方法采用針對支原體DNA的引物用PCR檢測可疑樣本,其中PCR引物通常針對支原體的16S rRNA基因。在凝膠電泳過程中,支原體DNA會顯示為特異性條帶,以此指示支原體的存在。PCR法可以檢測大多數(shù)支原體,但謹(jǐn)慎起見同時使用另一種檢測方法來進(jìn)行驗(yàn)證。
酶學(xué)檢測和ELISA
此外,也還存在一些其他支原體檢測方法。例如酶學(xué)檢測是將可疑樣本添加到特定底物中,在這一體系內(nèi)支原體的酶可以將ADP轉(zhuǎn)化為ATP,隨后能利用ATP發(fā)光的luciferase酶就可以指示支原體的存在。ELISA也能用于支原體檢測,以ELISA法為基礎(chǔ)的支原體檢測一般使用針對支原體16S rRNA基因的帶標(biāo)記探針或抗體,來檢測培養(yǎng)物中是否含有支原體。
定期檢測
支原體感染會使培養(yǎng)細(xì)胞慢慢枯萎,因此對培養(yǎng)細(xì)胞定期進(jìn)行支原體檢測非常重要。一般來說每1至3個月就應(yīng)該進(jìn)行一次支原體檢測。將定期支原體檢測常規(guī)化堅持下去,是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對支原體感染的關(guān)鍵。
PC-9細(xì)胞|人肺癌細(xì)胞|STR入庫
出庫公司 細(xì)胞代號 細(xì)胞名稱 備注
慧穎生物 siha 人宮頸癌細(xì)胞 STR
慧穎生物 MCF-7 人乳腺癌細(xì)胞 STR
慧穎生物 Hela 人宮頸癌細(xì)胞 STR
慧穎生物 HCT116 人的結(jié)腸癌細(xì)胞 STR
慧穎生物 Hep G2 人肝癌細(xì)胞 STR
慧穎生物 NCI-H1437 人肺癌細(xì)胞 STR
慧穎生物 DU 145 人前列腺癌細(xì)胞 STR
慧穎生物 HT1080 人纖維肉瘤細(xì)胞 STR
慧穎生物 T24 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 STR
慧穎生物 T47D 人乳腺管癌細(xì)胞 STR
慧穎生物 5637 人膀胱癌細(xì)胞 STR
慧穎生物 U251 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞 STR
慧穎生物 PANC-1 人胰腺癌細(xì)胞 STR
預(yù)防支原體污染的建議:
培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:
控制環(huán)境污染;
嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;
細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;
在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。
支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體zui突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如 -內(nèi)酰胺類、萬古霉素等*不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體zui有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些氟喹諾酮;其他類抗生素如氨基糖苷類、氯霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
支原體污染在細(xì)胞培養(yǎng)中實(shí)際上是比較常見的, 據(jù)資料, 可達(dá)30%甚至更高. 支原體污染時細(xì)胞表現(xiàn)為長得不好,也不死亡, 同時, 培養(yǎng)基又是清亮的. 時間長達(dá)一周也沒有什么變化. 這時基本上可以判斷出是支原體污染了, 愿意檢測就檢測一下,不愿意直接用清除試劑處理吧.
避免細(xì)胞污染,可以從預(yù)防著手,超凈工作臺物品放置要合理、進(jìn)入細(xì)胞房要換鞋和穿實(shí)驗(yàn)服、實(shí)驗(yàn)員戴手套后要用酒精等消毒、避免細(xì)胞交叉污染等等。