MDCK（NBL-2） 狗腎細胞 凍存細胞 復蘇細胞 耐藥株 細胞染色 細胞培養(yǎng)技術 正常細胞株 腫瘤細胞株 原代細胞 貼壁細胞 懸浮細胞 ATCC引進細胞 轉染細胞 400多種類熱賣細胞株細胞系等您來挑選！

產品名稱：MDCK(NBL-2) 狗腎細胞

細胞簡介：MDCK細胞為狗腎上皮細胞，來源于狗腎，中文名為狗腎上皮細胞，正常的細胞形態(tài)為上皮樣，貼壁生長。

培養(yǎng)基：EMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件：37℃ 5% CO2

消化條件：0.25% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA溶液，消化10-15min

傳化比例：1：2-1：6

換液時間：2-3天換液一次

凍存液比例：85%培養(yǎng)基，10%FBS, 5% (v/v) DMSO

凍存密度：1-3 ×10^6/管，液氮保存

MDCK（NBL-2） 狗腎細胞 操作說明：

懸浮生長細胞的傳代：直接直接吸去或離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液懸浮細胞，1：3或1：5稀釋細胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

貼壁生長細胞的傳代：吸去培養(yǎng)液，用PBS洗滌細胞一次，加入消化液，在37℃中消化約3～10分鐘，待細胞開始脫落時，倒去消化液，加入新鮮培養(yǎng)液，懸浮和吹打分散細胞。也可以待細胞*消化脫落，500×g離心5分鐘，去除消化液，用新鮮培養(yǎng)液懸浮細胞。1：3或1：5稀釋細胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

2）細胞株的凍存：

1． 取培養(yǎng)2～3天生長旺盛的細胞，用細胞培養(yǎng)液將細胞配成2×106～2×107/ml。

2． 在1ml細胞凍存管中加入0.5ml細胞懸液，0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亞砜（或甘油），混勻后密封。置4℃ 1小時，－20℃ 2小時，然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上隔夜后浸入液氮中。

3）細胞株的復蘇：復蘇時，從液氮中取出凍存管，立即置37℃水浴中融化細胞。將細胞直接加入10ml含15％小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中，置37℃ 5％CO2飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。懸浮細胞待細胞全部沉降后小心吸去上清液，更換新鮮的上述培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)；帖壁細胞則培養(yǎng)2～3小時，待細胞帖壁后，倒去培養(yǎng)液，更換新鮮的上述培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。也可以在加入新鮮培養(yǎng)液以后，500×g離心5分鐘，去上清液，加入新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。

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