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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業,制藥 |
|---|
產品介紹
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix是即用型2×預混溶液，包含Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase，dNTP以及對高通量測序文庫擴增而精心優化的緩沖體系，具有靈敏度高、特異性強、保真性好等優點。在進行擴增反應時，體系只需加入引物和模板即可，簡化了實驗操作步驟，減少了人為誤差，提高了實驗通量和結果的重復性。本產品提供是所有試劑組分均經過嚴格質檢，最高程度保障產品優異性能和批次間穩定性。
產品信息
貨號 | 12928ES30 |
規格 | 5mL |
儲存條件
-25~-15℃保存，有效期1年。
使用說明
使用說明正文
文庫擴增反應體系（冰上配制）
將表1中試劑解凍后顛倒混勻，置于冰上備用。
于無菌PCR管中配制表1所示反應體系。
表1. PCR擴增反應體系
組分 | 體積 (µL) |
模板DNA | X |
正向引物 (10-25 μM） | 1-2.5 |
反向引物 (10-25 μM） | 1-2.5 |
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix | 25 |
ddH2O | Total to 50 |
使用移液器輕輕吹打貨震蕩混勻，并短暫離心將反應液收集至管底。
將PCR管置于PCR儀中，設置表2所示反應程序，進行PCR擴增。
表2. PCR擴增反應程序
溫度 | 時間 | 循環數 |
98°C | 1 min | 1 |
98°C | 10 sec | 1-15（根據實驗要求） |
60°C | 30 sec | |
72°C | 30 sec | |
72°C | 5 min | 1 |
4°C | Hold | - |
【注】：
1)預變性溫度推薦使用98°C。預變性推薦時間：質粒DNA等簡單模板為30 sec；文庫為1 min；cDNA、基因組DNA等復雜模板為3 min；高GC含量模板為5-10 min。
2) 退火溫度推薦使用60°C，也可根據需要，設立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度。推薦退火時間為20 sec，可以在10-30 sec內調節。退火時間太長可能導致擴增產物在膠上呈彌散狀。
3) 延伸溫度和時間：推薦使用72°C，延伸時間根據實際需要進行調整。
注意事項
1. 本產品僅作科研用途。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
