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產品簡介
| 供貨周期 | 兩周 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
|---|
產品介紹
產品簡介
PCSK9(前蛋白轉化酶枯草桿菌蛋白酶kexin 9)，也稱為前蛋白轉化酶9或NARC-1(神經凋亡調節轉化酶1)，是枯草桿菌蛋白酶相關 內蛋白酶的蛋白酶K亞家族的成員。小鼠PCSK9 cDNA編碼694個氨基酸，包括一個信號肽、一個前結構域和一個催化結構域。PCSK9在肝、腸和腎中高度表達。
PCSK9的主要生理功能是介導低密度脂蛋白受體(LDLR)的降解。在人類中，遺傳分析表明，在PCSK9基因中具有無義或功能喪失突變的個體具有顯著較低的血漿LDL 水平，而在小鼠中，施用PCSK9中和抗體或反義寡核苷酸降低血清 。這些研究清楚地表明，PCSK9在降低肝臟LDLR水平中起著關鍵作用。矛盾的是，服用降 藥物如他汀類藥物似乎會增加PCSK9的產生。
產品信息
貨號 | 98019ES48 / 98019ES96 |
規格 | 48 T / 96 T |
檢測范圍 | 31.25-2000 pg/mL |
檢測方法 | 雙抗夾心法 |
檢測物種 | 小鼠 |
檢測時長 | 4小時50分鐘 |
靈敏度 | 1.620 pg/mL |
稀釋線性 | 71.3 - 103.2% |
回收率 | 72.9 - 129.4% |
板內差 | 7.2% |
板間差 | 7.4% |
實驗數據
標曲數據
數據擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數據分析。
標準曲線圖
濃度（pg/mL） | 顯色值 | 平均值 | 校準值 | |
2000 | 2.971 | 2.754 | 2.862 | 2.817 |
1000 | 1.744 | 1.610 | 1.677 | 1.631 |
500 | 0.909 | 0.901 | 0.905 | 0.860 |
250 | 0.519 | 0.488 | 0.503 | 0.458 |
125 | 0.295 | 0.277 | 0.286 | 0.241 |
62.5 | 0.188 | 0.165 | 0.176 | 0.131 |
31.25 | 0.111 | 0.103 | 0.107 | 0.062 |
0 | 0.047 | 0.044 | 0.045 | / |
靈敏度檢測
Mouse PCSK9的檢測限為1.620 pg/mL，通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
精密度檢測
酶標板內精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定20次，評估酶標板內的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測32次，評估酶標板間的精密度。
項目 | 板內精密度 | 板間精密度 | ||||
樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
20 | 20 | 20 | 32 | 32 | 32 | |
平均值 | 784.0 | 182.4 | 39.9 | 850.1 | 199.6 | 42.8 |
標準差 | 49.4 | 13.0 | 3.3 | 57.5 | 17.6 | 2.8 |
變異系數（%） | 6.3 | 7.1 | 8.1 | 6.8 | 8.8 | 6.5 |
回收率檢測
通過不同水平的Mouse PCSK9添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
樣本類型 | 平均回收率(%) | 范圍（%） |
血清 | 96.2 | 72.9-114.6 |
血jiang | 101.8 | 81.8-119.4 |
細胞培養上清 | 107.2 | 86.5-129.4 |
稀釋線性檢測
血清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 98.0 | 95.6-104.0 |
1:04 | 93.8 | 89.1-96.1 |
1:08 | 87.7 | 84.7-92.3 |
1:16 | 78.7 | 71.3-88.1 |
血漿稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 96.5 | 90.3-103.2 |
1:04 | 91.3 | 78.1-100.6 |
1:08 | 89.7 | 80.3-102.3 |
1:16 | 75.9 | 75.0-76.4 |
細胞培養上清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 93.2 | 88.5-98.3 |
1:04 | 91.4 | 88.9-95.3 |
1:08 | 84.8 | 81.5-88.3 |
1:16 | 80.2 | 77.9-83.3 |
樣本值
應用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 | 樣本數目 | 平均值（ng/mL） | 樣本值（ng/mL） |
血清 | 13 | 217 | 112-312 |
血漿 | 11 | 583 | 412-748 |
細胞培養上清 | 10 | n.d. | n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得31.25 pg/mL
測定特異性
本試劑盒識別天然和重組小鼠PCSK9。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
Recombinant human: | Recombinant Mouse: |
PCSK1 | Furin |
PCSK7 | LDL R |
PCSK9 | VLDL R |
檢測簡圖
疑問解答
問題 | 造成原因 | 解決方法 |
標曲不好 | 移液量不準確 | 檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當 | ||
顯色值偏低 | 孵育時間太短 | 給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當 | 校準移液器和規范操作 | |
CV偏高 | 酶標板清洗不當 | 使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 準備新鮮洗液 | |
靈敏度較低 | 試劑盒儲存不當 | 按照產品組分表進行保存。 |
