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15067ESFuniCut® HaeIII限制性內切酶
參考價165
具體成交價以合同協議為準
  • 15067ES 型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產商 廠商性質
  • 上海市 所在地

規格
300 T165元99 件 可售

訪問次數:184更新時間:2024-03-17 18:34:49

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產品簡介
供貨周期 現貨 應用領域 醫療衛生,生物產業
FuniCut® 系列內切酶是通過基因工程重組技術,可在5~15 min內精確完成DNA切割的快速限制性內切酶,適用于快速切割質粒DNA、PCR產物、基因組DNA等。FuniCut® 系列快速內切酶共用一種酶切緩沖液,從而簡化了酶切反應體系,另外,有良好的酶活冗余度,可輕松處理底物過量或困難模板的酶切。
產品介紹

產品簡介

 

FuniCut® 系列內切酶是通過基因工程重組技術,可在5~15 min內精確完成DNA切割的快速限制性內切酶,適用于快速切割質粒DNA、PCR產物、基因組DNA等。FuniCut® 系列快速內切酶共用一種酶切緩沖液,從而簡化了酶切反應體系,另外,有良好的酶活冗余度,可輕松處理底物過量或困難模板的酶切。

 

產品信息

 

貨號

15067ES75

規格

300 T

識別位置

5'-GG↓CC-3'

3'-CC↑GG-5'

推薦反應條件

1×FuniCut® 緩沖液;37°C孵育

酶活

10 U/μL

失活條件

80℃溫育20 min

同裂酶

BsuRI, BshFI, BspANI, BsnI

 

組分信息

 

組分編號

組分名稱

15067ES75

15067-A

FuniCut® HaeIII

300 μL

15067-B

10×FuniCut® Buffer

2×1 mL

15067-C

10×FuniCut® Color Buffer*

2×1 mL

*10×FuniCut® Color Buffer包括紅色和黃色示蹤染料,可將產物直接用于凝膠電泳。FuniCut® Color Buffer的紅色染料與2500 bp雙鏈DNA片段在1%瓊脂糖凝膠中遷移速率接近;黃色染料與10 bp雙鏈DNA片段在1%瓊脂糖凝膠中遷移速率接近。

 

儲存條件

 

-25~-15℃保存,有效期2年。

注意事項

1. 3 h孵育未表現星號活性,延時酶切可能出現星號活性。

2. 本產品僅作科研用途

3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

 

使用方法

 

1. DNA快速酶切流程

1) 按如下建議的加樣順序配制體系反應液(冰上操作)

組分

質粒DNA

PCR產物

基因組DNA

ddH2O

15 μL

16 μL

30 μL

10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer

2 μL

3 μL*

5 μL

底物DNA

2 μL (~1 μg)

10 μL (~0.2 μg)

10 μL (5 μg)

FuniCut® HaeIII

1 μL

1 μL

5 μL

Total

20 μL

30 μL

50 μL

*本體系指已純化后的PCR產物。未純化的PCR產物具備一定的離子強度,10×FuniCut® Buffer加入量可適當減少至2 μL。若下一步進行克隆等實驗,酶切前需純化PCR產物。

2) 輕柔吸打或輕彈管壁以混勻(切勿渦旋),然后瞬時離心以收集掛壁液滴。

3) 37°C孵育15 min(質粒),或15~30 min(PCR產物),或30~60 min(基因組DNA)。

4) 80℃溫育20 min即可使酶失活,停止反應(可選)。

5) 如果使用FuniCut® Color Buffer進行酶切反應,得到的產物可直接上樣電泳。

2. 雙酶切或多酶切

1) 每種內切酶的用量為1 μL,并根據需要適當擴大反應體系。

2) 所有內切酶的體積總和不得超過總反應體系的1/10。

3) 如果選用的幾種內切酶的最適反應溫度不同,應先以最適溫度低的酶開始酶切,再添加最適溫度較高的酶,以較高的溫度進行孵育。

3. 質粒的擴大反應體系

組分

體積(20 μL)

體積(20 μL)

體積(50 μL)*

DNA

1 μg

2 μg

5 μg

10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer

2 μL

2 μL

5 μL

FuniCut® HaeIII

1 μL

2 μL

5 μL

Total

20 μL

20 μL

50 μL

*如果總反應體系大于20 μL,可使用水浴、金屬浴或沙浴,并增加孵育時間。

4. 不同DNA中的識別位點數

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

SV40

M13mp18/19

Adeno2

149

11

22

13

11

19

15

216

5. 甲基化修飾影響

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

無影響

無影響

無影響

無影響

無影響

6. 不同反應緩沖液中的活性*

反應緩沖液

FuniCut® Buffer

Thermo Scientific

FastDigest Buffer

NEB

CutSmart® Buffer

Takara

QuickCut™ Buffer

活性

100%

100%

100%

100%

*活性數據來自翌圣生物限制酶標準反應體系下的檢測。




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