華雅干細胞提供的人臍帶間充質干細胞是P1代的凍存細胞，或者P1\P2代復蘇細胞，可為用戶量身定制。該細胞取自滿月自然分娩的胎兒臍帶，采用無血清人臍帶間充質干細胞培養(yǎng)基純化培養(yǎng)，凍存細胞每支含量為≥2.2×10⁶個，復蘇細胞每T-25含量≥1.5×10⁶。該細胞無支原體、病毒、細菌等外源性微生物污染；內毒素指標符合行業(yè)標準；具有良好的增殖和分化能力，可以培養(yǎng)多代并維持未分化狀態(tài)；可附帶干細胞表面標記物流式鑒定報告及相應病原微生物檢測報告。

貨號

HUMSC-01；HUMSC-02A/B；HUMSC-03A/B

規(guī)格

按需定制

培養(yǎng)基

無血清培養(yǎng)基或常規(guī)培養(yǎng)體系

運輸

干冰/特制運輸體系

細胞特征

細胞鏡下觀察：細胞貼壁, 長成梭形，有些細胞排列呈魚貫狀相連，間有旋禍狀排列。經過測試具備間充質干細胞的性能特征，具有良好的增殖和分化潛能，可分化為成骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞等。

質量控制

嚴格的細菌、真菌、病毒（HIV、HBV、HCV）、支原體檢測，可附第三方檢測報告。

培養(yǎng)條件

37℃，5% CO₂，PH值7.2~7.4，無菌恒溫培養(yǎng)。

用途

本產品僅供科研。

相關操作

細胞復蘇

1.把HUMSC培養(yǎng)基放入37℃水浴中預熱；

2.從液氮中取出HUMSC迅速放入37℃水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)孵育細胞）；

3.在超凈臺中加入5ml的HUMSC培養(yǎng)基重懸細胞，1000rpm離心5min；

4.棄上清，加入5ml的HUMSC培養(yǎng)基重懸細胞，轉移到T-25培養(yǎng)瓶；

5.將培養(yǎng)瓶置于37℃，5% CO₂的無菌恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

6.第二天，用新鮮的HUMSC培養(yǎng)基給細胞換液。

傳代培養(yǎng)

1.在顯微鏡下觀察細胞，當細胞融合度至80%時，即可傳代；

2.37℃水浴預熱培養(yǎng)基；

3.在超凈臺中，棄掉T-25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，加入2ml PBS清洗，再加入1ml 0.25%胰酶-EDTA消化細胞；

4.在顯微鏡下觀察到細胞變圓，有細胞開始脫離瓶壁時，即可加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

5.用移液器輕輕吹打瓶壁上剩余的細胞，并輕輕吹打將細胞吹散；

6.將細胞轉移到15ml離心管中，1200rpm離心4min；

7.棄上清，加入15-20ml的培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T-75細胞培養(yǎng)瓶中或按適當比例傳到 T-25細胞培養(yǎng)瓶中。確保細胞貼壁后融合度在25-50%之間，細胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25 瓶），混合細胞懸液，確保細胞均勻分布；

8.將細胞培養(yǎng)瓶置于37℃，5% CO2的無菌恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

9.每兩天用新鮮、預熱的培養(yǎng)基進行換液。

細胞凍存

1.細胞消化和計數，用胰酶對待凍存的細胞進行消化，并對細胞進行計數。

2.1200rpm離心4分鐘，去掉上清。

3.根據細胞計數的情況，加入適量的凍存液，使細胞密度在1×106/ml左右（或根據自己希望達到的細胞密度）。

4.輕輕地重懸細胞，將重懸的細胞按等份加入到滅菌的凍存管（需提前做好標記或者貼上標簽）中，旋緊凍存管蓋。

5.將凍存管放入程序降溫凍存盒中，然后將凍存盒直接放入-80℃。

6.第二天將細胞從-80℃轉移到液氮中。

提示：細胞培養(yǎng)方案及涉及到的所有試劑耗材，可統(tǒng)一匹配，具體詳情，可在線咨詢。

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