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PSGro人iPSC/ESC胚胎干細胞無血清培養基

PSGro人iPSC/ESC胚胎干細胞無血清培養基
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
  • 型號
  • 品牌 StemRD/美國
  • 廠商性質 代理商
  • 所在地 重慶市

更新時間:2018-10-25 11:32:57瀏覽次數:2221

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產品簡介
產地類別 進口
PSGro人iPSC/ESC胚胎干細胞無血清培養基是為人類誘導的多能干細胞(IPSCs)和人類胚胎干細胞(ESCS)而設計的。它是無血清和化學定義的,因為它的所有成分是合成的化學品或純化的重組蛋白。

PSGro人iPSC/ESC胚胎干細胞無血清培養基支持在細胞外基質蛋白(如BD Matrigel™)上的人iPSCs或人ESCs的無飼養生長和維持。其性能與市場*的mTeSR™1或E8相比,在生長速度、特征形態、插件標記、正常核型和向不同胚層的分化等方面都有一定的優勢。

 

PSGro人iPSC/ESC胚胎干細胞無血清培養基

訂購信息

品牌         貨號        產品描述                            包裝

StemRD     PGroF-500    PSGro-Free®iPSC/ESC Growth Medium    500mL/套

                        人iPSC/ESC胚胎干細胞生長培養基

 

歡迎您致電 重慶市華雅干細胞技術有限公司 189 2296 8205   Q 3054606584

華雅干細胞-客服中心:4000212020

 

內容和存儲

PSGro-Free®(Cat。#PGroF)包含兩個組件:

組件

尺寸

存儲

保質期

基礎培養基(在凝膠冰上)

450毫升

2至8°C。 遠離光明

6個月

10x補充劑(干冰)

50毫升

-20°C或以下。 遠離光明

6個月

 

需要或建議的其他關鍵試劑

  1. 細胞外基質蛋白,例如Matrigel TM(BD,cat#354277)或等同物
  2. Accutase(Millipore,SCR005)或Collagenase IV(Invitrogen,17104)或同等物
  3. ROCK抑制劑Y-27632(StemRD,Y-01 / -05 / -25)或Thiazovivin(StemRD,Thia-01 / -05 / -25)

 

中等準備

  1. 在4°C下解凍PSGro-Free®補充劑。 如果需要,可以將解凍的Supplement等分并儲存在-20°C或更低溫度下,但應避免進一步凍融。
  2. 要制備PSGro-Free®*培養基,將1份補充劑加入9份基礎培養基中。
  3. 如果需要,可以將抗生素添加到*培養基中。
  4. 一旦制成,PSGro-Free®*培養基在2至8°C的黑暗中儲存時可穩定2周。

 

具有細胞外基質蛋白的涂層板,例如Matrigel TM

請參閱制造商的說明。 對于BD Matrigel™,可遵循以下程序:

  1. 在冰上解凍Matrigel™。 用預冷的DMEM培養基稀釋基質膠1:50。
  2. 立即使用稀釋的Matrigel™溶液涂覆組織培養板。 對于6孔板,每孔使用1 mL稀釋的Matrigel™溶液,旋轉平板使溶液均勻涂抹。
  3. 讓板在37℃下放置1小時或在4℃下放置過夜。

 

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生長無飼養細胞適應PSGro-Free®

已經在較常用的hiPSC / ESC培養基中生長的人iPSC或ESC可以容易地適應PSGro-Free®。 用PSGro-Free®進行一輪1:1稀釋的含血清或無血清培養基通常就足夠了。 然而,對于某些媒體和細胞系,可能需要更長和更多的研究生適應。

 

生長飼養細胞依賴細胞適應PSGro-Free®

  1. 用Accutase,Collagenase IV或同等物質分離細胞。
  2. 添加以前使用的培養基,輕輕刮去細胞作為聚集體。 理想的聚集體尺寸與他介質類似,過度移液的單細胞可能會降低電鍍效率。
  3. 將具有細胞聚集體的懸浮液轉移到15ml管中。
  4. 在室溫下以200×g離心5分鐘。
  5. 丟棄Matrigel™溶液,立即添加PSGro-Free®(例如,2 mL /孔用于6孔板)。
  6. 離心后,棄去上清液,用2mL先前使用的培養基輕輕重懸沉淀。 注意:向培養基中添加ROCK抑制劑(Y-27632或Thiazovivin)可顯著提高存活率和電鍍效率。
  7. 用PSGro-Free®將先前使用的培養基中的細胞聚集體轉移到孔中。 混合。 輕輕地。
  8. 在37℃,5%CO 2和95%濕度下培養細胞。
  9. 如果星期五播種細胞,請在周一更換培養基至4 mL PSGro-Free®(周末無需更換)。 如果細胞在一周中的其他日子播種,則在第二天更換。

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PSGro-Free®中冷凍細胞的回收

  1. 在37°C水浴中快速解凍hiPSC或hESC,將內容物轉移至15 mL管中。 在溫和混合下將10mL先前用于細胞的培養基滴加到管中。
  2. 在室溫下以200×g離心細胞5分鐘。
  3. 丟棄Matrigel™溶液,立即添加PSGro-Free®(例如,2 mL /孔用于6孔板)。
  4. 離心后,棄去上清液,用2mL先前使用的培養基輕輕重懸沉淀。 注意:向培養基中添加ROCK抑制劑(Y-27632或Thiazovivin)可顯著提高存活率和電鍍效率。
  5. 用PSGro-Free®將先前使用的培養基中的細胞聚集體轉移到平板上。 輕輕混合。
  6. 在37℃,5%CO 2和95%濕度下培養細胞。
  7. 第二天將培養基更換為4 mL PSGro-Free®。

 

在無飼養細胞條件下傳代PSGro-Free®中的細胞

  1. 在顯微鏡下觀察以識別分化區域。 使用平板底部的鏡頭標記(例如,6孔板)標記分化的菌落
  2. 通過用移液管*或抽吸刮擦去除分化區域。
  3. 從細胞培養物中吸出培養基并用PBS沖洗。
  4. 每孔加入0.5 mL Accutase或Collagenase IV。 在室溫下靜置1-2分鐘。
  5. 取出Accutase,用2 mL PSGro-Free®輕輕沖洗2-3次,以去除殘留的酶。
  6. 加入2 mL /孔PSGro-Free®并用細胞刮刀刮掉菌落。
  7. 將分離的細胞聚集體轉移至15 mL錐形管中,并用另外2 mL PSGro-Free®沖洗孔以收集任何剩余的聚集體。
  8. 在室溫下以200×g離心5分鐘。
  9. 吸出上清液。 通過輕輕移液將沉淀重懸于4 mL PSGro-Free®中。 注意:向培養基中添加ROCK抑制劑(Y-27632或Thiazovivin)可顯著提高存活率和電鍍效率。
  10. 用PSGro-Free®將細胞聚集體鋪在涂有Matrigel™的新平板上。
  11. 在37℃,5%CO 2和95%濕度下培養細胞。 每天更換介質。
  12. 如果星期五播種細胞,請在周一更換培養基至4 mL PSGro-Free®(周末無需更換)。 如果細胞在一周中的其他日子播種,則在第二天更換。 注意:如果菌落處于*密度,細胞可以每隔5-7天分裂,使用1:5到1:10的分裂。

 

PSGro-Free®中細胞的低溫保存

  1. 準備含有90%PSGro-Free®和10%DMSO的冷凍培養基。 注意:向培養基中添加ROCK抑制劑(Y-27632或Thiazovivin)可顯著提高存活率和電鍍效率。
  2. 在無飼料條件下,從PSGro-Free®中傳代細胞進行步驟1-8
  3. 輕輕吸出上清液,注意保持細胞沉淀完整。
  4. 輕輕地將沉淀重懸于冷凍培養基中,注意使細胞聚集體比通常用于傳代的細胞更大。
  5. 將冷凍培養基中的1mL細胞聚集體轉移到每個標記的冷凍管中。
  6. 將小瓶置于異丙醇冷凍容器中,并將容器置于-80℃
  7. 第二天轉移到液氮罐中進行長期儲存。

 

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提供產品:華雅干細胞致力于為中國干細胞領域的干細胞科學研究、臍帶血/造血干細胞/臍帶/脂肪/胎盤干細胞庫、干細胞臨床轉化醫學、干細胞美容及干細胞抗衰老、免疫細胞治療、T細胞治療、臨床干細胞治療等再生醫學和個體化治療產業鏈的相關客戶提供:MSC間充質干細胞培養基、iPS/ES胚胎干細胞培養基、血清替代物、羊水培養基、基底膜基質膠細胞支架、干細胞生長分化調控因子、BioMarker 流式檢測抗體、支原體檢測試劑盒、內毒素檢測試劑盒、干細胞存儲細胞凍存袋、細胞培養瓶、USP級DMSO二甲基亞砜細胞凍存液、細胞培養相關試劑耗材儀器等種類豐富的產品,以“Focus on improving the quality of Stem Cells專注干細胞研究,提升干細胞品質”為己任,我們與客戶攜手為中國干細胞產業的發展而前行。

 

重慶市華雅干細胞技術有限公司主營:干細胞、細胞凍存、細胞治療、試劑耗材 相關板塊的產品,以“傳遞科學價值,服務科學研究”為宗旨,經過近五年的努力推廣,重慶市華雅干細胞技術有限公司在全中國代理的BD科研產品、OriGen干細胞凍存袋等產品已經成功銷往:上海市、北京市、重慶市、天津市、廣東省的廣州市、深圳市、珠海市、江西省的南昌市、四川省的成都市、綿陽、浙江省的杭州市、寧波、溫州、江蘇省的南京市、蘇州、無錫、泰州、湖南省的長沙、陜西省的西安市、楊凌、甘肅省的蘭州、寧夏的銀川、新疆的烏魯木齊、廣西的南寧市、山東省的濟南、青島、東北三省 遼寧省的沈陽市、大連市、吉林省的長春市、黑龍江省的哈爾濱市等中國絕大部分省市和自治區。

 

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