目錄:北京索萊寶科技有限公司>>免疫學試劑>> A2010-10AEC顯色試劑盒(20×)
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 10ml |
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貨號 | A2010 | 主要用途 | 適用于HRP系統的?IHC 和?Western Blot實驗的酶促顯色。 |
AEC顯色試劑盒(20×)是一種可以通過過氧化物酶催化底物3-氨基-9-乙基咔唑氧化形成紅色不溶性產物,以此鑒定過氧化物酶活性,從而確定目標分子表達情況,該種方法而經典。其適用于辣根過氧化酶標記蛋白的免疫學檢測(蛋白質免疫印記、免疫組織化學、以及原位雜交染色等)。產品性能穩定,操作便捷,敏感度高,顯色清晰,重復性好。
3-氨基-9-乙基咔唑(3-amino-9-ethylcarbazole;AEC)是過氧化物酶(Peroxidase)的生色底物,其分子式為C14H14N2,分子量為210.3。在過氧化物酶的催化下,電子供體AEC底物在過氧化氫氧化下,失去電子而呈現出顏色變化和沉積,形成穩定性紅色不溶性產物(能溶于有機試劑)。
3-氨基-9-乙基咔唑 (3-amino-9-ethylcarbazole,AEC) 是過氧化物酶 (Peroxidase) 的生色底物,在過氧化物酶的催化下,過氧化氫氧化AEC形成穩定的紅色沉淀產物。該紅色產物不溶于水,但溶于有機溶劑。該AEC底物顯色試劑盒加入了增強顯色試劑,敏感度大大提高。產品操作便捷,顯色清晰,重復性好,適用于HRP系統的 IHC 和 Western Blot實驗的酶促顯色。
AEC顯色試劑盒(20×)使用說明:
1.工作液配制:
取850ul無菌雙蒸水,依次加入50ul溶液A、50 ul溶液B、50ul溶液C、混合均勻,即配成AEC工作液。如需要更大體積工作液,可按相應比例放大。此溶液必須現用現配,配好后避光保存,半小時內使用,過期后請將剩余的液體廢棄。
2.顯色:
1)蛋白質印跡膜顯色:將配制好的工作液滴加在印跡膜上(或將印跡膜浸入AEC工作液中),顯色時間一般為10-30min。顯色完畢后,將膜浸入蒸餾水中,終止反應。
2)組織切片染色:向組織切片上加入適量AEC工作液,確保能充分覆蓋樣品。室溫孵育10-30 min,避免光照,直顯色預期深淺。可在顯微鏡下觀察控制顯色時間。顯色后用蒸餾水洗滌即可終止顯色反應。
3)對于組織切片或細胞樣品,顯色反應終止后,可對其進行其他染料復染。對于膜,顯色反應終止后,可以室溫晾干避光保存。
AEC顯色試劑盒(20×)注意事項:
1. 由于AEC生成的顏色產物為脂溶性,因此用于IHC顯色后不適合梯度酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片,須用水性封片劑封片。
2. 根據情況自行優化實驗條件,調整顯色時間,獲得佳顯色效果。
3. AEC有一定毒性,操作時請采取必要的防護措施。
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