目錄:北京索萊寶科技有限公司>>分子生物學>>PAGE凝膠銀染試劑盒>> 1LG7210 PAGE凝膠銀染試劑盒
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1L |
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貨號 | G7210 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,石油 |
主要用途 | 它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色。其靈敏度比考馬斯亮藍高,該產品整個過程操作簡單 |
G7210 PAGE凝膠銀染試劑盒
規格: 1L
保存: 室溫(15℃-25℃) 干燥保存,復檢期12 個月。
試劑盒內容:
**銀 2g
染色液A 100ml
顯色液B 100ml
顯色液C 100ml
終止液D 100ml
注:1L 規格指可配制的**銀染色液的體積,實際使用次數根據PAGE 膠大小不同而不同。
二、G7210 PAGE凝膠銀染試劑盒的簡介:
核酸銀染的原理是銀離子可與核酸形成穩定的復合物,然后用還原劑如甲醛在堿性環境下使Ag+還原成銀
顆粒,可把核酸電泳帶染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色。其靈敏度比EB 高200 倍,該產品
整個過程只需要20 分鐘,操作簡單,靈敏度高,能檢測到10ng 以下的DNA 條帶。
三、的使用操作步驟:
一、染色液配制
需要配制的染色液體積根據PAGE 膠的大小而定,一般的mini-PAGE 膠需要20-30mL。配制用的器皿清洗
干凈后用去離子水涮洗,染色液須用去離子水配制,現用現配。如果配制的溶液體積不是100mL,可以按比例
改變各成分用量。
1,**銀染液:稱取0.2g **銀,加入到90ml 去離子水中*溶解,加入10ml 溶液A 混勻,現用現配。
2,顯色液:分別取溶液B 和溶液C 各10ml 加入80ml 去離子水中混勻,現用現配。
3,終止液:取終止液D 10ml 加去離子水稀釋100ml,現用現配。
二、:
1,PAGE 電泳結束后,將PAGE 蛋白膠轉移玻璃平皿或搪瓷盤中,用去離子水漂洗兩遍,每次2min。
2,將PAGE 膠轉移**銀染液中,使染液沒過PAGE 膠,室溫染色10min??芍糜趽u床上緩慢搖晃,使
其染色均勻。
3,棄去染色液,用去離子水快速漂洗三次,每次半分鐘。
4,將PAGE 膠轉移顯色液中,使顯色液沒過PAGE 膠,室溫搖晃顯色條帶清晰可見。
5,可選,將PAGE 膠轉移終止液中,終止顯色1min。
6,銀染后PAGE 膠可拍照保存或用于后續試驗。
四、PAGE 凝膠快速銀染試劑盒的注意事項:
1. 銀染主要出現在PAGE 膠的表面,使用薄膠(0.5-0.75mm)可以提高靈敏度。
2. 對于考馬斯亮藍染色的SDS-PAGE 膠,可用甲醇將膠漂洗后,繼續進行銀染??既具^程中的乙酸會干
擾銀染,因此要確保將PAGE 凝膠中殘留的乙酸*洗凈。
3. 不同蛋白質對銀染的反應是不一樣的,尤其是堿性蛋白染色效果差。因此,不宜用銀染測定不同蛋白
的比例。
4. 染色過程中,緩慢的振蕩是必要的,一般選擇40-60 rpm.
5. 凝膠表面的裂紋多是由于壓力、手印及表面干燥所致,所以全程中都應帶手套操作。
6. PAGE 凝膠背景呈均一的黑色多是水中的雜質引起的,所以溶液的配制應使用電導率小于1 μS 的去離
子水。
7. 如果染色后有呈灰塵或煙霧狀灰色或棕色的沉淀出現在凝膠表面,可能是在幾步漂洗過程中洗得不夠
*,或是染色過程時溫度太低。
8. 較深的銀染背景多是丙烯酰胺中的雜質所致。
9. PAGE 膠中的甘油、尿素、甘氨酸、Triton X-100 和兩性電解質這些物質會干擾銀染。
10. 室溫操作時,溫度的波動往往會干擾銀染的效果,恒溫水浴可以解決這個問題。
11. 憑借戊二醛預處理可以使各種蛋白質的染色提高40 倍。
12. 染色使用的玻璃器皿必須非常干凈,用酸浸泡可以滿足要求。
13. 銀染應盡快照相,隨著時間延長,蛋白條帶會變淺,而背景會加深。
14. 銀染容器理想的是玻璃平皿,其次是搪瓷盤和密胺塑料盤等。
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