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儀器的維護與保養(二)
續前期內容,下面分別介紹進樣部分、分離部分、檢測部分的使用方法和注意事項。
3、進樣系統
進樣系統分為手動進樣閥和自動進樣器。
1、手動進樣閥。對于手動進樣閥使用過程中需要注意每個樣品進樣完成后應對進樣閥進行清洗,防止殘留對下一個樣品分析的影響。還需要注意進樣方式,以20μL定量環為例,我們可以選擇*充滿定量管或部分充滿定量管。為了保證進樣的重復性,選擇*充滿定量管進樣方式時,需要注入定量環體積3倍以上的樣品;選擇部分充滿定量管進樣方式時,進樣體積應在定量管體積一半以下,即1-10μL。
2、自動進樣器。如果采用自動進樣器進樣,首先需要保證注射器里面沒有氣泡存在,否則影響進樣量準確性;其次是樣品瓶里面有足夠的樣品,保證進樣針能夠吸到樣品。為了避免交叉污染需要定期對樣品瓶、蓋和墊進行清洗。若自動進樣器長時間不使用,應該注意:腐蝕性的流動相或洗液(例如,堿性或酸性緩沖溶液)必須*從系統中置換出來。同時,為了避免細菌的生長,應將一個樣品瓶中充滿甲醇,并重復幾次進樣操作。
4、分離系統
分離系統包括色譜柱、保護柱以及柱溫箱。
1、色譜柱。色譜柱是樣品分離的核心。色譜柱在使用前必須仔細閱讀說明書,了解色譜柱使用的pH值范圍、溶劑耐受范圍、壓力范圍和維護方法等事項。色譜柱使用完后,需及時對色譜柱進行沖洗。沖洗完成后,應該將色譜柱從儀器上拆下來,兩端用廠家配的堵頭密封后,保存在色譜柱盒里。
2、保護柱。保護柱的作用主要是防止吸附性強的雜質對色譜柱污染,從而延長色譜柱的壽命。針對不同型號的色譜柱,應選擇相對應填料的保護柱。應注意柱芯也是有壽命的,應該定期進行更換。
3、柱溫箱。色譜柱溫度變化,可能會導致保留時間的變化。為了避免這個問題,建議使用柱溫箱。
5、檢測系統
HPLC常用的檢測器是紫外檢測器。在日常使用過程中紫外檢測器主要需要注意檢測池和氘燈的使用與維護。
1、檢測池。檢測池長時間使用可能會造成污染,如果儀器的參比能量(REF ENERGY)正常,測量能量(SMP ENERGY)偏低,可能為檢測池污染導致,可以對檢測池進行清洗。對檢測池零件的進行清洗,一般先采用約1:4的硝酸溶液超聲清洗,分別用純水和甲醇溶液清洗,然后重新組裝并將檢測池池體推進池腔內,擰緊池板螺絲。注意組裝中,池玻璃及墊片一定要放正,以免壓碎池玻璃,造成檢測池泄漏。
檢測器檢測池組裝示意圖
1.檢測池前板;2.檢測池體;3.池體螺絲;4.池板螺絲;5.壓緊螺母;
6.壓緊螺母墊片;7.池玻璃;8.池玻璃墊片。
2、氘燈。氘燈正常使用壽命可在1500小時以上。燈的使用壽命與檢測器的使用時間和開啟頻率有關,因此使用過程中應盡量節省不必要的開機時間,減少開關頻率,以延長氘燈的使用壽命。如果準確地判斷出氘燈已經不能點亮或能量太低,則需要更換新的氘燈。在購買氘燈時,應注意咨詢和核對氘燈的型號與儀器型號是否匹配。更換到氘燈時,參照儀器說明書中的相關內容,特別要注意氘燈連接線的位置順序。
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