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851次豬(Pig)甲狀腺素(T4)檢測試劑盒
本試劑僅供研究使用
試驗原理:
T4試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知T4濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將T4和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中T4的濃度呈比例關(guān)系。
試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存) | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
96/48人份酶標板 | 1塊板(96T) | 半塊板(48T) | 即用型 |
塑料膜板蓋 | 1塊 | 半塊 | 即用型 |
標準品:800nmol/L | 1瓶(0.6ml) | 1瓶(0.3ml) | 按說明書進行稀稀 |
空白對照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 即用型 |
標準品稀釋緩沖液 | 1瓶(4.0ml) | 1瓶(2.0ml) | 即用型 |
生物素標記的抗T4抗體 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
親和鏈酶素-HRP | 1瓶(8.0ml) | 1瓶(4.0ml) | 即用型 |
洗滌緩沖液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
終止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
標本稀釋液 | 1瓶(12ml) | 1瓶(6.0ml) | 即用型 |
自備材料
安全性
操作注意事項
樣品收集、處理及保存方法
試劑的準備
800 nmol/L | (6號標準品) | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
400 nmol/L | (5號標準品) | 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
200 nmol/L | (4號標準品) | 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
100 nmol/L | (3號標準品) | 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
50 nmol/L | (2號標準品) | 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
25 nmol/L | (1號標準品) | 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
0 nmol/L | (空白對照) | 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
操作步驟
建議使用的實驗方案
| 標準品濃度(nmol/L) |
| ||||||||||
A | 800 | 800 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
B | 400 | 400 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
C | 200 | 200 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
D | 100 | 100 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
E | 50 | 50 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
F | 25 | 25 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
G | 0 | 0 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
H | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
局限
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。
3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的T4標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的T4含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3、檢測值范圍:0-800nmol/L
4、敏感度: 1.0 nmol/L
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