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684次雞誘導型一氧化氮合成酶2a酶聯免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍: 48T
0.3 IU/L -8 IU/L
使用目的:
本試劑盒用于測定雞血清、血漿及相關液體樣本中誘導型一氧化氮合成酶2a(iNOS 2a)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞誘導型一氧化氮合成酶2a(iNOS 2a)水平。用純化的雞誘導型一氧化氮合成酶2a(iNOS 2a)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入誘導型一氧化氮合成酶2a(iNOS 2a),再與HRP標記的誘導型一氧化氮合成酶2a(iNOS 2a)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的誘導型一氧化氮合成酶2a(iNOS 2a)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中雞誘導型一氧化氮合成酶2a(iNOS 2a)濃度。
試劑盒組成
1 | 20倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 3ml×1瓶 |
2 | 酶標試劑 | 3ml×1瓶 | 8 | 標準品(16 IU/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12孔×4條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 3ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 3ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 3ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
8IU/L | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
4 IU/L | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2 IU/L | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
1 IU/L | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
0.5 IU/L | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
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