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測序級重組胰蛋白酶MTrypsin

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更新時間:2020-09-03 14:56:03瀏覽次數:951

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產品簡介

供貨周期 一個月以上 應用領域 生物產業
測序級重組胰蛋白酶MTrypsin
◆概述
胰蛋白酶(Trypsin; EC 3.4.21.4)是一種絲氨酸蛋白酶,酶解賴氨酸及精氨酸C末端形成的肽鍵。重組豬胰蛋白酶是由重組畢赤酵母表達并采用層析色譜法純化獲得,氨基酸序列與豬胰腺來源的陽離子型胰蛋白酶*一致。未經修飾的胰蛋白酶自切降解肽段,可能對蛋白質測序及液質聯用質量肽圖檢測造成干擾,自切降解會造成消化樣品過程中酶活性降低。

詳細介紹

測序級重組胰蛋白酶MTrypsin

 

 

◆概述

胰蛋白酶(Trypsin; EC 3.4.21.4)是一種絲氨酸蛋白酶,酶解賴氨酸及精氨酸C末端形成的肽鍵。重組豬胰蛋白酶是由重組畢赤酵母表達并采用層析色譜法純化獲得,氨基酸序列與豬胰腺來源的陽離子型胰蛋白酶*一致。未經修飾的胰蛋白酶自切降解肽段,可能對蛋白質測序及液質聯用質量肽圖檢測造成干擾,自切降解會造成消化樣品過程中酶活性降低,且被證明可能產生胰糜蛋白酶活性。本品為重組表達胰蛋白酶,多步純化無雜酶活性;經還原甲基化修飾,在蛋白組學及質量肽圖研究中,對單獨酶切或與Lys-C分步/混合酶切時,對蛋白酶水解具有抵抗力,從而保證其活性高穩定性好。活性受絲氨酸蛋白酶抑制劑如TLCK、PMSF等的抑制,金屬離子螯合劑如EDTA等抑制酶活。

 

◆特點

●  優良的穩定性:0.1 mg/mL測序級胰蛋白酶MTP,于50 mmol NH4HCO3酶切緩沖中37℃水浴反應過夜(15 h),酶活保留超過90%。

●  良好的特異性:利用測序級胰蛋白酶MTP,1:50(w/w)酶切人胰島素B鏈,RP-HPLC于214 nm波長檢測酶切產物,酶切16 h產物與2 h產物相比,產物肽峰比例增加而個數為2個且不隨時間延長增加。

 

◆特性

性狀    白色或類白色凍干粉

純度    ≥95%

相對分子量    23 kDa±2.3 kDa

酶比活性    ≥3800 USP/mg 

 

◆來源

由重組畢赤酵母表達并采用層析色譜法純化獲得,氨基酸序列與豬胰腺來源的陽離子型胰蛋白酶*一致。 

 

◆穩定性

酶穩定性對比研究

考察樣品均為RTP凍干粉或MTP凍干粉用10 mmol/L HCl或50 mmol/L NH4HCO3溶解的酶溶液(含量為0.1 mg/mL)。

 

 

◆使用方法

溶解緩沖:10 mmol/L HCl或CH3COOH,20 mmol/L CaCl2;溶解后分裝-15℃以下保存。

酶切緩沖:50 mmol/L Tris-HCl或50 mmol/ NH4HCO3,1 mmol/L CaCl2,pH 7.6~8.0;

推薦條件:50 mmol/L Tris-HCl或50 mmol/ NH4HCO3,1 mmol/L CaCl2酶切緩沖中,1:20~1:100比例與待消化蛋白(含量0.5~1.0 mg/mL)混合,30~37℃進行酶切反應;經變性處理的蛋白,尿素或鹽酸胍建議稀

推薦條件:釋至1 mol/L以下。

 

◆應用實例

MTP與RTP用于酶切質量肽圖對比

 

 

獲取質譜分子量肽峰個數

備注

MTP(黑色)

13

1:50酶切15 h

RTP(藍色)

9

 

◆保存條件

儲存穩定性:凍干粉存于-15℃以下,24個月穩定;HCl或CH3COOH溶解后,分裝凍存于-15℃以下。

運輸穩定性:冰袋保溫運輸,活性穩定。

 

◆產品列表

產品編號產品名稱包裝
 MTP1504 測序級重組胰蛋白酶MTrypsin 20 μg
 MTP1505 測序級重組胰蛋白酶MTrypsin 20 μg×5

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