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目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測試劑盒>>輔酶Ⅰ系列>> 單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)生化盒

單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)生化盒
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參考價300-5000/盒
具體成交價以合同協議為準

參考價:¥300 ~ ¥5000

具體成交價以合同協議為準
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更新時間:2024-11-23 10:24:55瀏覽次數:1277評價

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供貨周期 現貨 規格 100管/96樣 50管/48樣
貨號 EY-01S112 應用領域 生物產業
主要用途 僅用于科研
單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)生化檢測試劑盒MDHAR催化MDHA還原生成AsA,在抗壞血酸氧化還原代謝中具有重要作用。

商品屬性:

產品名稱:單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)生化檢測試劑盒

規格:100/96 50/48 

貨號 : EY-01S112

測試方法:微量法 紫外分光光度法  

分類:輔酶系列

商品詳情:

測定意義:

MDHAR催化MDHA還原生成AsA,在抗壞血酸氧化還原代謝中具有重要作用。

測定原理:

MDHAR 催化 NADH 還原MDHA 生成 AsANAD+NADH340 nm有特征吸收峰,但是NAD+沒有。通過測定340 nm光吸收下降速率,來計算出MDHAR活性。

實驗中所需儀器及設備:

研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液槍和雙蒸水

5.png



ADH測定操作:

1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。

2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min。

3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液、800μL試劑三和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A測定管=A1-A2。

測定步驟:

1、分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。

2、將試劑二在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。

3、操作表:

試劑名稱μL

測定孔

樣本

20

試劑二

760

試劑三

10

試劑四

10


將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,混勻后立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和反應1min后的吸光度A2,計算ΔA=A1-A2。

注意:若A1-A2大于0.5,需將樣本用提取液稀釋,使A1-A2小于0.5,可提高檢測靈敏度。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

NAD-MDH活力單位的計算:

1、血清(漿)NAD-MDH活力的計算

單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=6430×ΔA

2、組織、細菌或細胞中NAD-MDH活力的計算:

(1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T =6430×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總)÷T=3.215×ΔA

V反總:反應體系總體積,8×10-4 L;ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,1 min;W:樣本質量,g;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;2000:細胞或細菌總數,2000萬。

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